circPTPRA与miR-1252在胃癌中的表达及其对细胞生物学行为的影响
2021-07-16吉鸿索丹赵耀李顺乐徐心常帅
吉鸿,索丹,赵耀,李顺乐,徐心,常帅
由于胃癌患者早期缺乏临床特征,导致多数患者被确诊时已发展为进展期胃癌,因此错失最佳治疗时机,预后较差[1]。因此,探究胃癌发生及发展的分子机制或寻找相关生物标记物将有助于胃癌的诊断及治疗。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种由反式剪接形成的非编码RNA,主要由外显子环化合成。circRNA与胃癌的发生及发展密切相关,并有可能作为胃癌治疗的靶点[2-4]。已知circPTPRA在膀胱癌中表达下调,其表达上调可抑制细胞增殖及转移[5],但与胃癌的相关研究报道较少。生物信息学分析预测显示,circPTPRA与miR-1252存在结合位点,后者在胃癌中表达上调,且可通过PAK3途径抑制胃癌的进展[6]。因此,circPTPRA可能通过靶向miR-1252参与胃癌的发生及发展。有鉴于此,本研究对circPTPRA与miR-1252在胃癌中的表达情况及其对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响进行研究,以探讨circPTPRA/miR-1252分子轴在胃癌中的可能作用。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
选取2019年1月至2020年3月间西安交通大学第二附属医院收治的42例胃癌患者作为研究对象,其中男22例,女20例;年龄55~69岁,平均年龄(62.74±4.31)岁。取术中切除的胃癌组织与癌旁组织(距癌组织>5 cm处的组织)于-80 ℃冰箱内保存。本研究获本医院伦理委员会审批。
人胃癌细胞HGC-27购自上海通派生物;DMEM购自美国Gibco;Lipofectamine2000、Trizol购自美国Invitrogen;逆转录与荧光定量PCR试剂购自北京天根生化;pcDNA购自上海远慕生物;pcDNA-circPTPRA购自美国Invitrogen(图1);si-NC、si-circPTPRA、miR-NC、miR-1252 mimics、anti-miR-NC、anti-miR-1252均购自广州锐博生物;CCK-8试剂、Transwell小室、Matrigel基质胶购自北京索莱宝;兔抗人MMP-2抗体(批号EPR1184、货号ab92536)、兔抗人MMP-9抗体(批号EP1255Y、货号ab137867)与二抗购自美国Abcam。……p>
