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多重PCR技术检测食品中鼠伤寒沙门氏菌3 种毒力基因

2021-07-15谭燕肖紫鸣李小林张洁宋文军魏纪平乔长晟

食品研究与开发 2021年12期
关键词:检测方法

谭燕,肖紫鸣,李小林,张洁,宋文军,魏纪平,乔长晟

(天津商业大学生物技术与食品科学学院,天津 300134)

大肠杆菌O157:H7 和鼠伤寒沙门氏菌是食物中毒暴发的病原体,大多数新鲜农产品容易受到病原体的污染,从而导致食源性疾病的暴发[1-2]。 沙门氏菌是一种革兰氏阴性菌,属于肠杆菌科,是引起食源性疾病的主要原因[3-4]。 据统计分析,1996 年~2015 年的沙门氏菌食物中毒事件166 起,累计发病8 996 人[5]。 在沙门氏菌2 500 多种血清型中,少于100 种会导致大多数人感染,鼠伤寒沙门氏菌引发的污染常占前两位[6-7]。 感染鼠伤寒沙门氏菌轻至肠炎,临床表现为腹泻、恶心呕吐,重至败血症和全身系统性播散引起的内脏损害等症状[8-9]。 食源性致病菌的检测显得尤为重要。 近年来,随着现代分子生物学技术的不断发展和应用,研究者发现致病性细菌的致病力是大量细菌毒力相关基因相互作用的结果[10-13]。 近几年来基于分子生物学技术中的聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测[14]较于传统的微生物培养检测得到更多的应用。 聚合酶链反应检测方法不仅准确、灵敏,还能比传统的微生物检测更快速。 但是目前聚合酶链反应检测鼠伤寒沙门氏菌存在灵敏度不高,准确性不够等缺点。 为了提高检测鼠伤寒沙门氏菌的准确性和灵敏度,本研究用多重聚合酶链法对鼠伤寒沙门氏菌的多种毒力基因进行检测。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 试剂与菌种

Premix Tap(TaKaRa Tap Version 2.0 plus dye)、Ta-KaRa 试剂盒、TIANGEN D2000 Marker:天根生化科技(北京) 有限公司;Solarbio 50хTAE 缓冲液、Solarbio Goldview I 核酸染料、葡萄糖琼脂:北京索莱宝科技有限公司。……

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