白玉彬，图门乌力吉，萨仁其木格，双 金

（1.阿鲁科尔沁旗农牧局，内蒙古赤峰 025550；2.阿鲁科尔沁旗农牧业机械化服务中心，内蒙古赤峰 025550；3.内蒙古农业大学动物科学学院，呼和浩特 010018）

小球藻（chlorella）属绿藻纲小球藻科［1］，是一种陆生单细胞微藻，呈球形，直径3～8μm，据研究20多亿年前已出现，是地球上最早的生命之一，也是人类第一个人工培养的微藻［2］。小球藻约有10个品种，在自然界分布极广。

近年来随着藻类生物技术的发展，微藻在环保、保健食品及饲料添加剂的生产等方面已被广泛应用［3-5］。在欧美和日本等发达国家，尤其在日本将其作为保健食品和动物饲料添加剂已有50多年的历史。我国对微藻的研究始于20世纪50年代，到了80年代人们已了解微藻的形态和生物学特性，并开始培养，以藻类为原料的保健品、食品及其添加剂不断涌现［6］。研究表明，小球藻含有多种成分，尤其是蛋白质含量丰富［4-5］，另外富含独特的活性物质，如活性生长因子（CGF）［6］、多糖、生物素以及叶绿素与叶酸等四大成分［7］，具有诸多功效，如抗菌［8］、免疫［9］和解毒［10］，在家畜家禽饲料中的应用效果明显。目前，小球藻粉及其悬浮液已被我国农业农村部批准为新型饲料添加剂。

本试验应用一种陆生小球藻悬浮液（含活性小球藻1 000万/mL以上），添加于罕山白绒山羊母羊饲粮中，测定对其繁殖性能的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 小球藻制剂来源与制备

1.1.1 培养基小球藻培养基配方见表1。

表1 小球藻培养基配方 mg·L-1

1.1.2 培养程序小球藻母藻由内蒙古林业科学院提供。培养程序：母藻接种至100 mL，100 mL至1 L，1 L至5 L，再到18 L，最后到吨桶，每个梯度培养7 d。制成的小球藻制剂每毫升含1 000万小球藻细胞。

1.2 试验动物及试验设计

2018年2月初—2019年5月底，从罕山白绒山羊场基础母羊群中选择妊娠130 d左右母羊44只，随机分为2组，每组22只。对照组采用基础饲粮，无小球藻；试验组则在基础饲粮中加40 mL/（只·d）小球藻。试验期为50 d，其中预试期14 d、正试期36 d。

1.3 饲养管理

试验羊全期舍饲，每组一栏。饲喂方式为每天上午和下午定量饲喂全混合饲粮（TMR）2次，饮水1次。观察羊群采食、反刍、休息和分娩状态，发现异常要及时处置，并做好记录。

1.4 基础饲粮组成及营养水平

为了突出小球藻的营养差异，试验采用同一基础饲粮，并按NRC（1985）［11］要求把母羊饲粮营养水平进行调试计算，饲粮组成及营养水平见表2。

表2 饲粮组成及营养水平（干物质基础）

1.5 测定项目

1.5.1 草料采食量每组一栏，每天计量青干草和精料添槽量及剩余量，差值即每日一栏的消耗量，再除以羊数得单位草料采食量。

1.5.2 繁殖性能1）母羊繁殖率=（实际繁殖的母羊总数÷参与试验的母羊总数）×100%。

2）母羊产羔率=［初生羔羊总数（包括死胎）÷母羊总数］×100%。

3）羔羊体重：包括初生重、36日龄体重。

4）36日龄羔羊日增重=（平均36日龄体重-平均初生体重）÷36。

5）36日龄羔羊死亡率=（36日龄内羔羊死亡只数÷总初生羔羊数）×100%。

6）36日龄羔羊腹泻率=（36日龄内羔羊腹泻只数÷总初生羔羊数）×100%。

1.5.3 血清的分离和细胞因子、抗氧化物含量的测定把母羊血液在3 500 r/min离心10 min，分离血清，-25℃冷冻保存。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定血清细胞因子白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素1β（IL-1β）含量、干扰素ɑ（IFN-ɑ）含量及血清抗氧化物超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽（GSH）含量，试剂盒购自宝信生物科技有限公司。

1.5.4 经济效益对比分析1）收入=36日龄羔羊平均体重×单价-羔羊平均死亡损失。其中平均死亡损失=36日龄羔羊体重×单价×羔羊死亡率。2）支出=母羊TMR平均单耗×单价。3）利润=收入-支出。

1.6 数据的统计分析

用Excel表计算试验母羊产羔数、山母羊繁殖率、产羔率、羔羊初生重、羔羊死亡率、羔羊腹泻率、母羊和羔羊草料采食量、羔羊日增重及经济效益指标。

用非配对重复观察值不相等t检验方法对试验数据进行差异检验。

2 结果与分析

2.1 小球藻对母羊产羔率、繁殖率及羔羊腹泻率、死亡率的影响

见表3。

表3 母羊产羔率、繁殖率及羔羊腹泻率、死亡率测定结果

由表3可以看出：试验组母羊产羔率为100%，繁殖率为77.27%，明显高于对照组；试验组羔羊腹泻率和死亡率分别为13.64%、9.09%，均低于对照组。

2.2 小球藻对羔羊体重及日增重的影响

见表4。

由表4可以看出，试验组羔羊初生重稍高于对照组，但差异不显著（P＞0.05），试验组羔羊36日龄体重极显著高于对照组（P＜0.01），羔羊36日龄内日增重极显著高于对照组（P＜0.01）。

表4 羔羊体重、日增重测定结果

2.3 小球藻对母羊TMR采食量的影响

见表5。

表5 母羊TMR采食量测定结果

由表5可以看出：试验组母羊只均采食量比对照组下降9.89%。

结合表4数据可知，试验组羔羊增重速度比对照组快，但母羊TMR采食量却低于对照组，说明小球藻使母羊草料利用率提高。

2.4 小球藻对母羊血清细胞因子含量的影响

见表6。

表6 母羊血清细胞因子含量测定结果 ng·L-1

由表6可以看出：与对照组相比，试验组母羊IL-6和IL-1β含量极显著下降（P＜0.01），IFN-ɑ含量则显著下降（P＜0.05）。

2.5 小球藻对母羊血清抗氧化物含量的影响

见表7。

表7 母羊血清抗氧化物含量测定结果

由表7可以看出，与对照组想比，试验组母羊血清SOD和GSH含量均显著增加（P＜0.05）。

2.6 经济效益分析

见表8。

表8 只均母羊经济效益分析

由表8可以看出，只均母羊羔羊利润试验组（111.57元/只）比对照组（88.39元/只）高23.18元/只，提高26.22%，效果很明显。

3 讨论

本试验中，试验组产羔率和繁殖率比对照组高很多，分析原因可能与小球藻不直接相关，是母羊配种或妊娠诊断失误及一些偶然因素造成，如试验组产双羔较多，再如饲养管理等因素使对照组母羊流产，应该与小球藻营养没有直接的关系。

小球藻含有丰富的生长因子（CGF），它具有很强的免疫活性，尤其是对机体细胞免疫具有增强功效［12-14］。本试验结果表明，小球藻使母羊SOD和GSH含量显著提高，同时使血清IL-6、IL-1β和IFN-ɑ等细胞因子水平明显下降。说明小球藻可提高机体抗氧化能力，同时提高巨噬细胞的吞噬能力，促进淋巴细胞转化和增殖，并降低机体免疫系统的激活程度，最终减少单核巨噬细胞等免疫细胞释放一系列细胞因子的数量，使血清IL-6、IL-1β和IFN-ɑ水平明显下降，符合以往的研究结果［15］。

动物机体在应激反应或感染等情况下，引起免疫系统被激活，结果首先单核巨噬细胞和淋巴细胞诱发免疫反应，并很快释放包括IL-6、IL-1β和IFN-ɑ在内的一系列细胞因子［16］。细胞因子对动物代谢和内分泌具有较大的影响，包括免疫应激动物的外周组织吸收葡萄糖和氨基酸受到抑制，能量和蛋白质重新进行分配以满足与免疫有关器官组织的利用［17］，使动物生长发育受到抑制；其次，免疫系统激活的程度影响着动物的神经内分泌和生长速度。免疫系统高度激活使动物生长能力下降，除了物质代谢转向免疫外，还有一个很重要的原因就是因为细胞因子抑制了动物产生与生长发育相关激素的含量，如生长激素（GH）和胰岛素样生长因子（IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ）等的分泌水平，从而使血液GH、IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ含量下降［19］，影响动物正常生长发育。

因此，通过给母羊饲喂小球藻，使其免疫力提高而降低其免疫激活水平，减少细胞因子的释放，提高抗氧化物水平，同时提高循环血液中GH和IGF-Ⅰ含量，增加养分利用率而提高母羊泌乳能力，并增加其羔羊生长速度和免疫力，降低羔羊腹泻的发生和减少死亡率。

另外，小球藻含有丰富生物素、叶绿素、叶酸以及多糖等活性物质及其养分，也有助于提高母羊泌乳能力和羔羊生长发育［7］。

4 结论

1）添加小球藻的试验组羔羊初生重与对照组没有明显差异，但使羔羊体重和日增重明显提高。2）与对照组相比，试验组羔羊36日龄内腹泻率和死亡率明显下降。3）试验组母羊日均采食量低于对照组。4）与对照组相比，试验组血清IL-6（P＜0.01）、IFN-ɑ（P＜0.05）和IL-1β（P＜0.01）含量明显下降，血清SOD和GSH含量均显著增加（P＜0.05）。5）试验组每只羔羊利润（111.57元/只）比对照组（88.39元/只）高23.18元/只，提高26.22%，效果明显。