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鲁卡帕尼对于鱼藤酮诱导的SH⁃SY5Y细胞凋亡的影响

2021-07-10卢意卜璐璐林淡钰梁嫣然井秀娜陶恩祥

岭南急诊医学杂志 2021年3期
关键词:帕金森病

卢意 卜璐璐 林淡钰 梁嫣然 井秀娜 陶恩祥

帕金森病(PD)是临床上常见的一种神经退行性疾病,其发病率其次于阿尔茨海默病,中脑黑质致密部多巴胺能神经元的进行性丢失和路易体形成是它的主要病理特征。帕金森病的具体发病机制尚未明确,受氧化应激、炎症反应、细胞凋亡、线粒体功能障碍等多方面影响,有效抑制细胞凋亡是改善PD 的主要途径之一[1]。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)是一种DNA 修复酶,参与DNA 的损伤识别和信号传导等过程[2],鲁卡帕尼是一种常见的PARP 抑制剂,目前已经用于卵巢癌等多种癌症的治疗,其通过减少肿瘤细胞的DNA 损伤修复起到对肿瘤细胞的杀伤作用。近来有研究发现PARP 抑制剂对于创伤性颅脑损伤的神经细胞具有保护作用,而其对帕金森病中神经细胞的凋亡的影响还未有明确的说明[3]。本实验利用PARP 抑制剂鲁卡帕尼干预鱼藤酮对于SH⁃SY5Y 细胞的作用,检测细胞的生存率、凋亡率以及凋亡相关蛋白bcl⁃2 和bax 的蛋白表达量,探讨PARP 抑制剂鲁卡帕尼对于鱼藤酮诱导的SH⁃SY5Y 细胞凋亡的影响,从而希望能对帕金森病的诊治提供新的药物靶点和思路。

1 材料和方法

1.1 试剂与仪器实验中所用SHSY⁃5Y 细胞即人神经母细胞瘤细胞由本课题组长期保存,PARP抑制剂rucaparib 鲁卡帕尼购自Biofroxx 公司,细胞凋亡试剂盒购自美国thermofisher 公司,DMEM 培养基、胎牛血清、胰蛋白酶购自Gibco 公司,全反式维甲酸、Tris base、甘氨酸、十二烷基硫酸钠(SDS)购自sigma 公司,BCA 法测蛋白试剂盒、SDS⁃PAGE 凝胶配制试剂盒、RIPA 细胞裂解液购自上海碧云天科技有限公司,PVDF 膜购自Millipore 公司,Bcl⁃2、Bax 抗体购自abcam 公司。……

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