邱婷，占凌辉，陆程翔

厦门大学附属中山医院神经内科1、重症医学科2，福建 厦门 361004

细胞焦亡是一种新近研究发现的细胞死亡方式。它以伴随着大量炎症因子的释放为特征，能够诱发强烈的炎症反应。在多种炎症性疾病中已显示出与炎症反应的持续加重及不良预后有关[1-3]。既往认为，在急性胰腺炎中通常存在大量的细胞凋亡现象。近年来的研究显示，这些被检测出的凋亡细胞事实上有相当一部分其实是焦亡的细胞[4]。但是细胞焦亡在急性胰腺炎中的具体情况目前仍不清楚。本研究旨在探讨caspase-1依赖性腺泡细胞焦亡在急性胰腺炎中的具体情况，为临床治疗急性胰腺炎提供新的方向。

1 资料与方法

1.1 动物选择与分组 健康成年Wistar大鼠12只，体质量160～180 g。采用随机数表法将其分为对照组和胰腺炎组，每组6只。

1.2 模型制备及处理 实验前大鼠禁食12 h，自由饮水。胰腺炎组大鼠分2次腹腔内注射20%L-精氨酸溶液(2×100 mg/100 g)，间隔1 h。对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水(1.0 mL×2)。

1.3 光镜苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining，HE)观察胰腺组织病理学变化 造模成功后24 h，两组大鼠采血后处死，经腹腔分离切取胰腺组织块，常规石蜡包埋。将石蜡包埋的胰腺组织切片，行HE染色，在光镜下观察胰腺组织学改变。

1.4 蛋白免疫印迹(Western blot)检测腺泡细胞caspase-1、GSDMD表达情况 胰腺组织块以裂解液进行裂解。用BCA法测定蛋白质含量。之后稀释样本至2μg/μL。取40μg样品行SDS-PAGE电泳。用湿转法将凝胶上蛋白样品转印到PVDF膜上并加入兔一抗封闭过夜(GSDMD：Abcam公司；caspase-1：碧云天)。次日5%脱脂奶粉-TBST稀释二抗，羊抗兔ΙgG(H+L)HRP(GSDMD：abcam公司；……