吴冠瑾，闫福岭，刘琛，张川，秦树巧，冯静静，黑丹丹

1.河南大学附属郑州颐和医院神经内科，河南 郑州 450047；2.东南大学附属中大医院神经内科，江苏 南京 210009；3.郑州人民医院感染管理办公室，河南 郑州 450000

脑卒中(cerebral stroke)是导致全球人类高死亡率和高致残率的重要因素[1]。缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke)占脑卒中的80%以上。目前，对于缺血性卒中患者，主要的治疗方式是通过阻塞性动脉的溶栓和/或机械再通来尽早实行再灌注。然而，这些治疗方式由于治疗时间窗狭窄，出血风险等因素[2]，导致治疗效果并不理想。因此，深入了解缺血性脑卒中的发病机制，研发新的治疗手段，具有重要的临床意义。近年来，非编码RNA(ncRNA)在中枢神经系统的正常和病理状态下均起着至关重要的作用[3-6]。环状RNA(circRNA)是一种重要的非编码RNA，其3'和5'末端之间具有共价键，从而形成环状结构[7]，circRNA在人类细胞中高度保守并大量表达[8]。近年来的研究表明，短暂性脑局部缺血、氧气-葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation，OGD)均能促使神经元细胞中circRNA表达谱发生显著的改变[9]，但具体的调控机制还有待深入研究。本研究利用SH-SY5Y细胞建立OGD损伤模型，初步探讨has_circ_0067923在OGD导致的SH-SY5Y细胞增殖及凋亡中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞及试剂 SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞购自中国科学院细胞库。Cell Counting Kit-8试剂盒、Annexin V-FΙTC检测试剂盒、胰酶细胞消化液(0.25%胰酶)、RΙPA细胞快速裂解液、BCA试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司；MEM/F12培养基、无糖MEM/F12培养基、Lipofectamine 3000转染试剂、胎牛血清、TRΙzol购自美国Thermofisher；PrimeScript™RT Reagent Kit、TB Green Fast qPCR Mix购自日本TaKaRa公司；PVDF膜、化学发光试剂购自美国Millipore公 司；……