马彦娟，牛丽丹，张建新，吴 畏，孔令宇，蔡君艳，石金河

(新乡医学院第一附属医院急诊科，卫辉 453100)

急性胰腺炎(AP)是胰腺的突发性炎症过程，是由多种病因导致胰腺内胰酶被激活从而引发胰腺组织自身的炎症反应[1-2]，其发病机制复杂，涉及多种因素，包括活化的胰酶、细胞因子和趋化因子等[3]。转化生长因子β1(TGF-β1)参与调节细胞增殖、分化、凋亡和免疫反应等多种生物学过程[4]。研究显示，AP患者及AP模型动物的TGF-β1信号通路表达均上调[5-7]。动物实验显示，在AP模型大鼠血清中miRNA-216a mRNA的表达显著升高[8-9]。

课题组前期研究结果显示，地塞米松(DEX)对AP模型胰腺中的Notch信号通路有一定程度的影响[10]，对其他信号通路，如TGF-β1/Smad/细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号通路及miRNA-216a mRNA的影响还未见报道。本研究利用蛙皮素建立小鼠AP模型，进一步探索DEX对胰腺腺泡细胞保护的作用机制。

1 仪器与材料

1.1仪器 全自动生化检测仪(日本株式会社日立制作所)；LightCycler LC480 Real-Time PCR system(瑞士罗氏公司)；Bio-Rad SDS-PAGE型电泳分离仪(美国伯乐生命医学产品有限公司)；ODYSSEY型双色红外激光成像系统(美国LI-COR Biosciences公司)。

1.2试药 兔抗TGF-β1抗体(货号：ab92486)，兔抗P-Smad3抗体(货号：ab40854)，Smad7抗体(货号：ab216428)，兔抗磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/细胞外信号调节蛋白激酶2(P-ERK/ERK2)抗体(货号：ab17942)，均购自美国Abcam公司；兔抗GAPDH抗体，美国Sigma公司；RT-qPCR试剂盒，均购自北京全式金生物技术有限公司。淀粉酶(AMY)与脂肪酶(LPS)检测试剂盒，购于南京建成生物研究所；DEX(批号20140629)，天津金耀药业有限公司;蛙皮素(批号60321ES03)，上海翊圣生物科技有限公司。

1.3动物 清洁级健康雄性C57BL/6J小鼠60只，购于新乡医学院实验动物中心，体质量为25～30 g，实验过程经实验动物福利委员会许可，动物使用许可证号：SYXK(豫) 2011-0001。……