高迎新，应冲涛，崔 迪，梅传忠,3

肾癌(renal cell carcinoma,RCC)是我国常见的泌尿系统恶性肿瘤，发病率及死亡率呈现逐年增长趋势[1]。RCC的发生是多因素、多基因参与的复杂过程。微小RNA(micro-RNA,miRNA)是生物体内高度保守的单链RNA分子，在肿瘤细胞增殖、凋亡和侵袭等多种生物学进程中发挥重要作用[2]。miR-143是miRNA家族的重要成员，研究[3]发现，miR-143在RCC细胞中表达异常，其可能参与了RCC发生、发展过程。RCC的治疗以手术切除为主，但术后效果不理想，因此，寻找有效的靶向药物是近年来RCC治疗研究的热点。舒尼替尼作为RCC治疗的一线药物，可以阻断肿瘤的营养供给并直接攻击肿瘤细胞，临床作用明显[4]。已有证据[5]表明，舒尼替尼与肿瘤细胞中miR-143的表达相关。本研究将786-O细胞转染miR-143序列及用舒尼替尼处理后，观察细胞增殖、侵袭能力的改变，并检测舒尼替尼作用细胞后miR-143的表达变化，探讨miR-143在RCC细胞中的作用,舒尼替尼对miR-143表达的影响及与细胞增殖、侵袭的关系，以期为RCC的治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料 人RCC786-O细胞株购自中科院细胞研究所，舒尼替尼购自上海麦克林公司，RPMI-1640培养基购自美国Hyclone公司，胎牛血清购自美国Gibco公司，培养板、培养瓶及Transwell小室购自美国Corning公司，逆转录试剂盒购自日本Takara公司，总小RNA试剂盒、PCR试剂盒购自北京全式金公司，兔抗人单克隆抗体DNA甲基转移酶3B(DNMT3B)、兔抗人单克隆抗体p-Akt-S473、兔抗人单克隆抗体tubulin购自上海优宁维公司，miR-143及miR-NC慢病毒载体由上海吉玛公司设计并合成，miR-143引物由上海生工生物工程有限公司设计并合成。

1.2 实验分组 实验分为对照组、miR-143组、舒尼替尼组、共同作用组。……