陈 燕 吴英姿 罗绍驹 胡 浩 莫灼锚 张诗军△

1.中山大学附属第三医院中医科 (广东 广州，510630) 2.中山大学附属第一医院中医科

随着社会压力的增加和生活节奏的加快，越来越多的人表现出脾虚相关症状，而研究发现脾虚导致的内环境变化可能为肿瘤生长提供有利的土壤，正如《卫生宝鉴》所云“凡人脾胃虚弱，饮食不节或生冷过度，不能克化，致积聚结块”[1]。我们前期研究发现，脾虚内环境中有机阴离子转运肽(Oatp)2b1的分布及功能发生改变，此变化是脾虚湿浊转运障碍的物质基础之一，且与肝癌的发生和发展密切相关[2-4]。肿瘤干细胞(CSCs)干性的表达被认为是肿瘤发病、复发和转移的根源，研究发现机体受到内环境影响产生不同的肿瘤微环境，可能引发CSCs相关信号通路和表面分子标志物发生改变，其“干性”也可能随之发生变化[5,6]，但脾虚内环境变化对肝癌CSCs干性的影响鲜有报道。本研究将观察脾虚内环境变化对CSCs干性及其相关信号通路PTEN/AKT的影响，进一步探讨脾虚内环境与肝癌的关系。

1 材料与方法

1.1 动物和细胞 SPF级C57BL/6小鼠60只(体重18～22 g，5～6周龄，雄性)以及Hepa1-6小鼠肝癌细胞株，由广东省医学实验动物中心提供，动物合格证号[SYXK(粤)2013-0002]。所有小鼠饲养于广东省医学实验动物中心SPF环境。本实验严格遵守实验动物福利和伦理原则，并通过广东省医学实验动物中心实验动物伦理委员会伦理审查(No.13201711-20)。

1.2 试剂和仪器 利血平购于Sigma公司。DMEM、Trypsin-EDTA、血清购于Gibco公司。Transwell板和Matrigel胶购于Corning公司。CCK8试剂盒购于北京金式金生物科技有限公司。……