马文娣 田逸英 焦志远 周涛 范在丰

摘要 ：植物病原的快速检测对于植物病害防控具有重要意义。 重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification，RPA）是近年建立的等温核酸扩增技术，具有灵敏度高、特异性强、适用于现场快速检测等特点，已在多个领域广泛应用。本文对重组酶聚合酶扩增技术的原理、特性、检测方法及其在植物病原体检测领域的应用进展加以综述。

关键词 ：重组酶聚合酶扩增; 植物病原; 检测

中图分类号：

S 474

文献标识码： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2020038

Recombinase polymerase amplification and its applications in

quick detection of plant pathogens

MA Wendi， TIAN Yiying， JIAO Zhiyuan， ZHOU Tao， FAN Zaifeng*

（Department of Plant Pathology， China Agricultural University， Beijing 100193， China）

Abstract

The rapid diagnosis of plant pathogens is essential for efficient prevention and control of plant diseases. Recombinase polymerase amplification （RPA） is an isothermal nucleic acid amplification technology developed in recent years， which has been widely applied in many fields. It is suitable for on-site rapid detection with high sensitivity and strong specificity. In this paper， we review the principles， characteristics， detection methods of RPA and its applications in the detection of plant pathogens.

Key words

recombinase polymerase amplification; plant pathogen; detection

病原物的准确检测和鉴定是植物病害防控策略中的关键环节。20世纪80年代以来，随着聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）等分子生物学技术的迅速发展，核酸检测技术凭借其快速、灵敏、特异性强的特点被广泛应用于病原物检测与鉴定领域。然而，传统PCR对精密温控设备的依赖性较高，需要PCR热循环仪完成预变性、变性、退火及延伸等步骤，且反应耗时长，难以满足经济、高效的检测需求。

近年来，等温扩增技术逐渐发展成熟，与传统PCR相比，其无需热循环等步骤，反应温度单一，扩增反应更为迅速;如环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技术[1]，可以在较低的恒定温度下完成核酸的快速扩增，具有检测周期短、操作便捷、对精密温控设备的依赖程度低等显著优势。

2006年，Piepenburg等建立了由多种酶和蛋白质参与的重组酶聚合酶扩增（recombinase polymerase amplification，RPA）技术[2]。RPA技术扩增速度快，特异性强，灵敏度高，对环境条件要求较低，将扩增体系与其他检测技术结合，可以不再依赖精密的仪器设备，适用于病原物快速檢测及病害诊断，因此受到了广泛关注。……