韩玉泽 张春雨 梁慧 赵丹

心血管疾病是糖尿病患者最常见的并发症。心肌微血管内皮细胞(CMEC)占心脏细胞总数的1/3，在维持冠状动脉微血管和邻近心肌细胞正常功能方面起着关键作用[1]。然而，慢性高血糖等因素可引起CMEC功能障碍和凋亡，导致微血管病变[2]。罗格列酮是噻唑烷二酮类抗糖尿病药，可通过提高胰岛素的敏感性有效控制血糖。研究显示，罗格列酮可减轻CMEC损伤并改善其功能，对改善糖尿病心肌微血管病变具有重要意义[3-4]。在正常状态下，内皮细胞增殖能力有限，但在病理情况下内皮细胞增殖和迁移对血管修复具有始动作用[5]。然而，罗格列酮能否促进内皮细胞增殖并提高其迁移能力尚未可知。沉默信息调节因子1(Sirt1)是研究最为广泛的去乙酰化酶同源物，研究显示CMEC细胞Sirt1活性降低，可抑制细胞自噬，增强细胞凋亡，促进糖尿病冠状动脉微血管功能障碍的发生[6]。但目前尚不明确罗格列酮是否通过调控Sirt1表达影响CMEC增殖和迁移。本研究探讨罗格列酮对高糖处理的大鼠CMEC增殖和迁移的影响，并分析其对Sirt1表达的调控作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

大鼠心肌微血管内皮细胞CMEC购于德国微生物菌种保藏中心；RPMI-1640培养基、胎牛血清、青链霉素双抗溶液购于美国Gibco公司；罗格列酮(纯度为93.3%，批号100673-201902)购于中国食品药品检定研究院；Sirt1小干扰RNA(si-Sirt1)及其对照(si-NC)、PCR引物由上海生工公司提供；细胞计数试剂盒8(CCK-8)购于美国Sigma公司；Transwell小室购于美国BD公司；兔源抗Sirt1抗体、兔源抗P21抗体、兔源抗上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)抗体、山羊抗兔IgG二抗购于美国CST公司。……