高栋梁，张雷，张宏峰，杨喜明

作者单位：延安大学附属医院烧伤整形手外科，陕西 延安 716000

瘢痕疙瘩是一种病理性瘢痕，主要表现为皮肤损伤修复过程中结缔组织快速增殖，成纤维细胞过度生长，胶原大量沉积，并伴有炎症以及组织损伤等。瘢痕疙瘩生长在面部等部位严重影响病人的容貌，给病人带来极大的生活困扰。目前，瘢痕疙瘩的发病机制尚不十分清楚，临床缺乏特异性的治疗方法。因此，探究瘢痕疙瘩发生发展过程中的分子机制，为临床寻找新的防治方 法具有重要意义。研究结果表明，阻碍成纤维细胞的恶性增殖可抑制瘢痕疙瘩的生长。 微小 RNA（microRNA，miRNA）是一种具有广泛作用的非编码 RNA，主要调控转录后的靶基因水平，影响多种人类疾病的发生发展。研究证实，miRNA 的表达量异常与多种皮肤病如瘢痕疙瘩的病理进程紧密相关。研究显示，miR-4463 在瘢痕疙瘩组织中较正常对照明显降低，但其具体的作用机制尚不明确。本研究拟通过探究 miR-4463 对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、侵袭的影响及分子机制，为临床阐明瘢痕疙瘩发生发展分子机制提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 主要材料

胎牛血清 、DMEM 培养基 、Transwell 小室购自美国 Corning 公司，Trizol 试剂、Lipofectamine 2000 购自美国Invitrogen 公司 ，定量聚 合酶链反应（qPCR）试剂盒、cDNA 逆转录试剂盒购自中国Roche公司 ，细胞计数试剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）购自上海碧云天生物有限公司；Mataigel 胶购自美国 BD 公司，miR-4463 模拟物对照质粒、miR-4463 模拟物均购自广州锐博生物科技有限公司，荧光素酶试剂盒购自美国 Sigma 公司。……