王红 ，王恳 ，焦庆昉 ，杨万全 ，张镇 ，李婕婷 ，吴扶生 ，王瑾

作者单位：1 四川省中西医结合医院肿瘤科，四川 成都 610041；2 中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院血液科，河南 洛阳 471003

宫颈癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一，全世界范围内宫颈癌的新确诊病例超过 52.98 万∕年，是妇女癌症死亡的主要原因之一，其中大部分病人集中在发展中国家。目前手术、化疗及放疗是治疗宫颈癌的主要手段，但大部分病人仍发生复发转移，导致大部分病人的生存率无明显提高。Yes-associated protein（YAP）是 Hippo 信号通路下游的转录激活因子，YAP 蛋白参与了肿瘤细胞的增殖、迁移及侵袭过程，在肿瘤发展过程中发挥重要作用。本团队于 2017年 7月至 2018年 10月利用腺病毒靶向 YAP 干扰载体（pAd-si-YAP），了解 YAP 蛋白对宫颈癌细胞的恶性增殖及侵袭性的作用，为全方面了解宫颈癌的分子生物学机制提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

pAd-si-YAP、重组空载体腺病毒（pAdmock）均由中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院构建。人宫颈癌 CaSki 细胞株由中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院保存。DMEM 培养基及胎牛血清购自美国 HyClone 公司；Transwell 培养板购自美国 Gibco 公司；鼠抗人 β 肌动蛋白（β-actin）及 YAP 抗体购自美国 Santa Cruz 公司；RNase、碘化丙啶购自上海碧云天生物技术有限公司。荧光定量聚合酶链反应（qPCR）引物由TaKaRa 公司合成，测序也由该公司完成。

1.2 细胞培养及细胞感染

配置好含 10% 胎牛血清、100 U∕mL 青霉素及 100 U∕mL 链霉素细胞培养液，将 CaSki 细胞置于 37 ℃、5% 二氧化碳细胞孵箱中培养，取对数生长期细胞进行实验。将 CaSki 细……