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HPLC测定大豆皂苷方法的建立和优化

2021-06-16殷丛丛李文帅徐海军谈美霞赵晋忠杜维俊岳爱琴

山西农业科学 2021年6期
关键词:大豆标准检测

殷丛丛,李文帅,徐海军,谈美霞,王 敏,赵晋忠,杜维俊,岳爱琴

(1.山西农业大学基础部,山西太谷030801;2.山西农业大学农学院,山西太谷030801)

大豆(Glycine maxL.Merr.)皂苷是大豆种子中一类重要的次生代谢产物[1],属三萜齐墩果酸型皂苷。由大豆皂醇A、皂醇B这2种苷元结合β-D-葡萄糖、β-D-木糖、β-D-半乳糖、β-D-葡萄糖醛酸、α-L-阿拉伯糖、α-L-鼠李糖等6种糖基及其乙酰化糖基组成。依据其苷元的结构差异,分为A类、B类、E类和DDMP类大豆皂苷[2-4]。研究表明,大豆皂苷具有抗癌、抗炎、抗氧化、降低胆固醇、增强免疫和保护肝脏等多种对人体有益的生理功能[5-10],可开发成药品和保健品。在植物体中皂苷参与自身的防御反应[11],使植物具有抗病毒和抗虫害等抗性[12],同时它还是一种重要的杀菌剂、发泡剂和稳定剂[13-15],还可作为高级化妆品和食品的添加剂,具有很大的市场潜力和应用前景[16]。

GESTETNET等采用薄层色谱法分析水解纯化后的大豆皂苷,运用重量法测定脱脂豆粕中皂苷含量[17]。AMAROWICZ等采用Lichrosorb RP18柱配制甲醇-丙醇-水-甲酸(32∶4∶63∶0.1)的流动相,在RI检测器中分析大豆皂苷[17]。黄贤校等[18]以齐墩果酸标准品绘制标准曲线,建立相应的回归方程,测定大豆总皂苷含量。KRISHNAMURTHY等[19]利用HPLC-ESI-MS(Q)检测出各类型大豆皂苷的含量。目前,国内外对于大豆皂苷分析尚未建立标准方法,对于检测大豆皂苷主要采用分光光度法、高效液相色谱法(HPLC)[20]和高效液相色谱-电喷雾串联质谱法(HPLC-ESI-MS/MS)[21-22]。分光光度法主要是对总大豆皂苷含量进行测定,无法测定大豆样本的皂苷组成;HPLC法主要是对大豆皂苷的水解产物大豆皂醇A和B进行测定[23],无法对大豆皂苷进行直接检测;……

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