范爱玉，谢卫勇，骆芳茗，范爱霞

1深圳市龙岗区骨科医院，广东深圳 518116；2北京中医药大学深圳医院（龙岗）

类风湿性关节炎（RA）的病理表现主要为滑液中出现炎性细胞浸润，滑膜细胞增生引起免疫反应异常，导致关节软骨及骨持续性破坏［1］。全球范围内，RA的患病率为0.4%～1.3%，到2015年，超2 400万人患有RA［2-3］。目前RA的治疗手段包括非留体抗炎药（NSAIDs）、传统慢性抗风湿药、糖皮质激素类、生物制剂和基因治疗等［4］。但以上方法只能减轻RA患者临床症状和体征，毒副作用大，不能根治炎症。因此，寻求新的治疗方法具有重要意义。骨髓间充质干细胞（BMSC）是一种重要的成体多能祖细胞，具有低免疫原性、遗传背景稳定等特点，可以分化为骨骼、软骨和脂肪组织［5］。研究报道，同种或异种间充质干细胞（MSC）移植对胶原诱导的关节炎小鼠具有明显的治疗作用，但其潜在作用机制尚不清楚［6-7］。外泌体（Exo）内含有各种蛋白质、脂类、mRNA、miRNA和DNA片段等物质，在疾病的早期预防、诊断以及预后判断方面有重要意义［8］。因此，本研究从BMSC中分离获得Exo（BMSC-Exo），以弗氏完全佐剂（CFA）诱导的SD大鼠为研究对象，评价BMSC-Exo在CFA诱导RA大鼠中的治疗作用，从而为Exo临床治疗RA提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验药物及试剂 阳性对照药物塞来昔布（Cel）购于深圳市龙岗区骨科医院（批准文号：国药准字J20120063）；p-P65、P65、p-P50、P50、p-IκBα、IκBα、CD63、TSG101、CM130、GAPDH一抗和HRP标记的羊抗兔二抗购于CST公司；大鼠BMSC（货号：RAWMX-01001）和OriCell大鼠骨髓间质干细胞完全培养基（货号：RAWMX-90011）均购于赛业（苏州）生物科技有限公司；弗氏完全佐剂（货号：F5881）购于Sigma-Aldrich公司；BioLegend LEGENDplex多因子检测试剂盒（#740150）购于BioLegend公司，其余试剂均购于Sigma-Aldrich公司。……