孟晓京，刘亚军，项宁

秦皇岛市第一医院，河北秦皇岛 066000

众所周知，心血管疾病是全世界最致命的疾病。缺血再灌注（I/R）损伤是最常见的心血管疾病病理因素［1］。目前，非编码RNA［包括微小RNA（miRNA）和长链非编码RNA（lncRNA）］在心肌I/R损伤机制研究中已成为热门［2］。研究显示，lncRNA FGD5-AS1在牙周炎患者中表达下调，上调其表达可减轻脂多糖（LPS）诱导的牙周膜细胞损伤［3］。lncRNA FGD5-AS1在糖氧剥夺诱导的神经元损伤中低表达，其过表达可减轻糖氧剥夺诱导的神经元损伤［4］。miR-421在缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤中表达上调，下调其表达可抑制细胞凋亡从而减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤［5］。但lncRNA FGD5-AS1在缺氧/复氧诱导的心肌细胞中的表达与功能研究较少。2018年11月—2020年6月，本研究利用缺氧/复氧诱导心肌细胞，复制心肌I/R损伤模型，考察lncRNA FGD5-AS1在其中的表达及其对心肌细胞凋亡和氧化应激的影响，并探讨其可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 大鼠心肌细胞H9C2购自上海生物科学研究所细胞资源中心，PrimeScript RT、SYBR Premix Ex TaqⅡ试剂盒购自日本TaKaRa公司，MiScript逆转录试剂盒、MiScript SYBR-Green PCR试剂盒购自德 国Qiagen公 司，pcDNA、pcDNA-FGD5-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-421、si-NC、si-FGD5-AS1、miRNC、miR-421购自上海GenePharma公司，丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的检测试剂盒均购自江苏碧云天生物技术公司，膜联蛋白V（Annexin V）-FITC细胞凋亡试剂盒购自美国BD Pharmingen公司，细胞裂解缓冲液购自上海Sangon Biotech公司，pMIR GLO载体、双荧光素酶活性测定系统购自美国Promega公司。

1.2 细胞培养与缺氧/复氧处理 心肌细胞在补充了10%胎牛血清（FBS）的Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）中于37℃、5%CO2中培养。取心肌细胞，将其分为Con组和H/R组。Con组未进行处理；H/R组进行缺氧/复氧处理，即将心肌细胞在缺氧培养箱（95%N2、5%CO2）中缺氧培养3 h，然后在常规培养箱（95%空气、5%CO2）中复氧培养4 h［6］。……