劳征虹 吴云红 毛华君 管亮

乳腺癌是女性常见恶性肿瘤。尽管近年来乳腺癌的诊治方法不断改进，但仍是危害女性生命健康的重要疾病，其发病机制仍有待探索[1]。Rac1是小GTP结合蛋白，在多种类型细胞骨架蛋白重构和特异性基因表达中起调控作用。表皮生长因子受体激酶底物8样蛋白（epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein,EPS8L）是表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）信号通路细胞内底物，包括 EPS8、EPS8L1、EPS8L2 和 EPS8L3，均由 N 端磷酸结合蛋白（phosphotyrosine binding protein,PTB）区域、中间真核生物蛋白结构域（Src homology domain 3,SH3）和C端“效应区域”组成[2]。EPS8在多种实体瘤中表达升高，包括乳腺癌、宫颈癌、结肠癌、胰腺癌、甲状腺乳头状癌和口腔癌，并影响多种肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭转移[3]。研究发现，EPS8可与Sos-1、Abi-1形成复合物参与Ras-Rac信号通路，从而介导细胞骨架蛋白的重组和血管生成[4-6]；同时还可调节基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP-9）的表达与活化、降解细胞外基质，协同CXC趋化因子促进肿瘤细胞的迁移[7-8]。此外，研究发现，EPS8-Sos-1-Abi-1复合物的形成可调控EGFR介导蛋白激酶B（protein B,AKT）和细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase,ERK）的激活，促进Ras-Rac信号传导，加强细胞的迁移能力[9-10]。EPS8L3与EPS8具有类似的主要功能结构，但与肿瘤相关的研究报道不多。本研究旨在探讨EPS8L3对乳腺癌细胞迁移、侵袭的影响，并分析可能的作用机制，现报道如下。

1 材料和方法

1.1 材料 乳腺癌细胞株MAD-MB-231购自中国科学院上海细胞生物研究所。小牛血清、抗生素、DMEM培养基、PBS和含0.02%的胰酶购自美国GE公司。Trizol购自美国 Invitrogen公司，PrimeScriptTMⅣ 1st strand cDNA Synthesis Mix购自日本Takara公司。RIPA裂解液、BCA蛋白浓度测定试剂盒购自中国碧云天生物技术公司。红外荧光成像系统购自美国LI-COR公司。……