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过氧化氢处理体外培养小鼠晶状体上清液的蛋白组学分析

2021-06-10李果陈颖严宏周希瑗

中华实验眼科杂志 2021年5期

李果 陈颖 严宏 周希瑗

1重庆医科大学附属第二医院眼科 眼科学重庆市重点实验室 400010;2重庆医科大学附属第一医院眼科 400016;3西安市人民医院(西安市第四医院) 陕西省眼科医院 西北工业大学附属西安市第四医院 710004

晶状体是由晶状体囊和晶状体纤维构成的双凸透镜状透明无血管组织。晶状体囊为一层透明的薄膜,其控制着营养物质进入及代谢产物排出。当晶状体内的蛋白发生变性和凝聚,晶状体就逐渐变混浊,形成白内障。晶状体混浊主要与氧化应激损伤有关。已有的研究表明,在白内障形成过程中晶状体内蛋白可能通过晶状体囊膜渗漏到房水或者玻璃体液中[1],但是对这些渗漏蛋白质的具体成分还缺乏全面的了解。为了明确白内障晶状体渗漏蛋白质的成分,预测其对眼内其他组织可能的影响,本研究采用基于无标记液相色谱-串联质谱的定量蛋白质组学方法和多重微珠免疫分析系统分析过氧化氢诱导体外培养小鼠晶状体上清液中的蛋白质组成及其生物信息。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1实验动物 健康8~10周龄雄性C57BL/6J小鼠42只,体质量16~23 g,购自重庆医科大学动物实验中心[动物合格证编号:SYXK(渝)2018-0003]。将这些小鼠置于(24±1)℃、60%湿度下,进行12 h/12 h的光暗循环。本实验均遵循ARVO声明。本研究方案经重庆医科大学附属第一医院伦理委员会批准(批文号:2019-173)。

1.1.2主要试剂及仪器 M-199培养基(美国Gibco公司);体积分数3%过氧化氢溶液(美国Sigma公司);BCA蛋白定量试剂盒(美国Pierce公司);Bio-Plex Pro试剂盒Ⅲ(美国Bio-Rad公司);……

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