薛成 林益华 史永红

厦门大学附属第一医院呼吸与危重症医学科361000

特发性肺纤维化是呼吸内科的疑难病,可由微生物感染、吸入粉尘及颗粒、结缔组织病等引起。患者可出现渐进性的呼吸困难,最终导致死亡,对患者的工作和生活造成极大危害。它的病理基础为各种因素导致肺泡上皮的慢性损伤,造成肺瘢痕成纤维细胞的大量增生,合成大量的胶原纤维,最终导致肺结构的重塑和肺纤维化的产生[1]。因此,对肺瘢痕成纤维细胞过度增生的机制研究已成为特发性肺纤维化研究的热点。

LncRNA 为一类不编码蛋白质的长链RNA,通常通过miRNA 及信号通路对细胞的生物学行为起 重 要 的 调 控 作 用[2]。 转 化 生 长 因 子 β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad通路是与纤维化密切相关的一条信号通路,与心、肺、肝、肾等器官的纤维化密切相关[3]。Lnc RNA很可能也通过调控miRNA 进而影响TGF-β/Smad通路的活化,最终促进人肺瘢痕成纤维细胞的增殖。本研究首先通过原代培养人肺成纤维细胞与人肺瘢痕成纤维细胞,研究Lnc01287、miR-4500、TGF-β/Smad通路在2种细胞中的表达;再通过基因相互作用预测网站与双荧光素酶报告基因实验,研究Lnc01287、miR-4500、TGF-β/Smad 通路间的相互作用关系;最后通过基因过表达与抑制技术,研 究Lnc01287/miR-4500 通 过TGF-β/Smad通路对人肺瘢痕成纤维细胞增殖的调控,以期为发现治疗特发性肺纤维化的靶点、减缓此病的进展提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验标本 本研究获得了厦门大学附属第一医院伦理委员会的批准 (批号2020-02),实验标本取自健康者与稳定期的特发性肺纤维化患者。……