冯涛 李晶 潘金强 郑殿宇 鲁静 耿中利 马震

深静脉血栓形成(deep vein thrombosis DVT)是血管外科的常见周围血管疾病之一[1]。近年来，其发病率有逐年上升的趋势,20%～50%的深静脉血栓病人又在此基础上，发展成血栓后综合征(post-thrombotic syndrome，PTS)[2-4]。新疆地区的下肢深静脉血栓患病率在31.0%左右，远远高于其他国家和地区[5]。根据当地的生活习惯、饮食习惯、遗传因素等进行研究发现，吸烟、年龄、新鲜蔬菜摄入量是当地人群遗传性易栓症的主要影响因素。本次通过研究miR-5189-3p在大鼠体内过表达的干预实验，验证靶基因JAG1所在信号通路Notch中Notch1、Hes1、JAG1的表达情况，进一步验证miR-5189-3p在下肢深静脉血栓形成中的表达调控机制。

材料与方法

一、材料

1.实验动物：SPF级SD大鼠48只，体重180～200 g，于无特殊病原体(specific pathogen free,SPF)条件下饲养。饲养环境为温度 22～26 ℃，相对湿度 50%～60%，人工光照明暗各12 h。动物来源于三峡大学实验动物中心，使用许可证号：SYXK(鄂)2018-0104，动物合格证号：42010200002507。

2.实验试剂：HE染色试剂盒(Solarbio公司，中国)，SYBR Green PCR 试剂盒(Biosystems公司，美国)，逆转录试剂盒(TAKARA公司，日本)，Trizol(Ambion公司，美国)，BCA 蛋白浓度测定试剂盒(bioswamp公司，中国)，BAX Polyclonal Antibody(Bioswamp公司，中国)，Bcl-2 Polyclonal Antibody(Bioswamp公司，中国)。

二、方法

1.动物建模：本次建模以白云城等[6]建立的大鼠下腔静脉狭窄法建立大鼠下腔静脉血栓(DVT)模型。将48只SD大鼠随机分组，分为4组，分别为正常对照组(A组)、下腔静脉血栓模型组(B组)、hsa-miR-5189-3p 模拟物组(C组)和hsa-miR-5189-3p模拟物阴性对照组(D组)，每组12只。hsa-miR-5189-3p 模拟物组SD大鼠尾静脉注射hsa-miR-5189-3p mimics、hsa-miR-5189-3p模拟物阴性对照组SD大鼠尾静脉注射hsa-miR-5189-3p mimics NC，按5 μg/kg剂量，溶于1 ml生理盐水中，正常组和下腔静脉血栓模型组SD大鼠尾静脉注射等量生理盐水，注射后24 h造模。……