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TaqMan-rRT-PCR检测猪霍乱沙门菌方法的建立和实验室评价

2021-06-03张景山闫梅英樊粉霞

中国人兽共患病学报 2021年5期
关键词:检测

张景山,李 旭,闫梅英,阚 飙,樊粉霞

猪霍乱沙门氏菌是非伤寒沙门菌的一种,是引起仔猪副伤寒的主要病原菌[1-2],也容易侵染人[3],人感染后主要表现为高热及菌血症等全身性感染症状[2-4],但临床症状不典型,很难与伤寒及副伤寒沙门菌引起的肠热症及其他非沙门菌引起的人类发热症状区分,如布鲁氏菌病、钩端螺旋体病、斑疹伤寒及侵袭性金黄色葡萄球菌感染等。在发达国家,沙门菌引起的腹泻仍是公共卫生问题,但血液感染伤寒及非伤寒沙门菌的病例很少;在非洲,非伤寒沙门菌感染引起发热病例很常见[5];在我国,也有猪霍乱沙门菌引起败血症的报道[6-8]。

利用沙门菌增菌液进行细菌分离培养是传统鉴定猪霍乱沙门菌的方法[9-11]。对分离得到的疑似菌落进行生化及血清型凝集鉴定,需要3~5 d,耗时费力,同时血清凝集反应及酶联免疫吸附试验(ELISA)等存在交叉反应、特异性不高及敏感性低等一些问题,这样很容易引起病例漏诊、误诊而延误治疗。ELISA法诊断猪霍乱沙门菌比传统的方法时间短[12],但猪霍乱沙门菌与丙型副伤寒沙门菌两者的抗原式相同,均可引起血液感染,且利用血清凝集试验以及ELISA诊断疑似样本时会出现交叉[13],最终准确鉴别还需要特殊生化反应[14]。沙门菌血清分型鉴别主要基于细菌细胞壁脂多糖(O抗原)和鞭毛抗原(H抗原)[15],鞭毛抗原的编码基因两端在不同血清型沙门菌间高度保守,中间区域高度变异,有时能够根据变异区基因序列找到特异引物用于区分不同的血清型[16],但高度变异的特性作为分子检测靶标时也存在结果不准确的隐患。……

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