王悄悄，李超龙，张会芳，刘旭苗，郑 峰，汪春晖，潘秀珍，曹祥荣

猪链球菌(Streptococcussuis,S.suis)是一种重要的人兽共患病病原菌，不仅可以通过上呼吸道感染猪，也可以通过皮肤伤口或经口途径感染人[1]。人感染该菌的临床症状表现为脑膜炎、败血症、关节炎、心内膜炎等，病死率高达12.8%，常见后遗症包括听力损失和前庭功能障碍[2]。S.suis血清型众多，目前较为公认的有29种[3-4]，全世界已经报道了1 600余例人类感染病例，其中75%的病例是由2型猪链球菌(S.suis2)引起的[5]。S.suis2对公共健康造成了严重威胁，因此，对于S.suis2致病机制的研究具有重要意义。

CovR最早发现于化脓链球菌，通常与CovS(CsrS)共同组成二元信号转导系统(two-component signal transduction system，TCS)，主要参与透明质酸荚膜合成基因hasAB的调控[5]。课题组前期对CovR的研究发现，CovR是全面调节基因表达的负调控因子，其调控的下游靶基因可能涉及多个已知毒力因子及潜在的毒力因子[6]，然而，在S.suis2 05ZYH33基因组中未发现covS的同源基因，表明CovR是一个孤儿调控因子。近期，有研究发现丝/苏氨酸激酶可以对多种TCS发挥磷酸化调控，在无乳链球菌中STK1可以在体外对CovR/S的生物反应调节因子组分CovR进行磷酸化[7]。在S.suis2中也存在丝/苏氨酸激酶STK，研究表明STK通过磷酸化底物蛋白的丝氨酸/苏氨酸残基以达到调控靶蛋白的目的，从而在转录与翻译、细胞壁合成、细胞分裂、应激反应以及毒力因子的表达[8-11]等过程中发挥着重要作用。然而S.suis2编码的STK是否能对全局性毒力负调控因子CovR进行磷酸化作用尚不清楚。本研究参照Molle等[12]的实验方法，在E.coliBL21原核表达系统中共表达STK与CovR蛋白，旨在探讨STK对CovR的磷酸化作用以及寻找CovR关键磷酸化位点，为进一步探索CovR磷酸化机制及S.suis2的致病作用提供理论指导。……