吕昌伟 和晶 张乾 郗海涛 强毅 张静涛

西北大学附属医院/西安市第三医院骨科（西安710018）

类风湿性关节炎是一种慢性炎症性自身免疫性疾病，最终可导致骨关节损伤甚至残疾［1］。类风湿性关节炎病理改变以慢性滑膜炎和骨关节结构损害为特征，其发病机制尚未明确，目前并无完全有效的根治方法［2］。近来的研究显示，纤维样滑膜细胞（fibroblast⁃like synoviocyte，FLS）的异常活化在类风湿性关节炎的发展中发挥了关键作用，其可通过产生炎性因子引起滑膜炎症和病理损伤［3］。活化的FLS表现出过度增殖，并产生多种炎症因子、趋化因子和基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP），如TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6、CXCL10、MMP⁃2和MMP⁃9，造成关节的慢性炎症和持续性破坏［4］。肿瘤坏死因子受体相关因子3（TNF receptor associated factor 3，TRAF3）是属于肿瘤坏死因子受体作用因子超家族成员，是细胞内一种重要的负性调控蛋白，包括抑制CREB、NF⁃κB和STAT3信号［5］。NF⁃κB信号的异常激活可引起持续高强度炎症，导致IL⁃6、MMP⁃2、MMP⁃9、CXCL10等多种炎性因子水平升高，诱发多种自身免疫性疾病［6］，并在FLS的激活中发挥了重要作用［4］。

目前，氯喹用于类风湿性关节炎治疗取得了较好的疗效，但其作用机制尚不明确。本研究探讨氯喹对FLS异常激活的抑制作用，并通过探讨氯喹对TRAF3蛋白水平的影响，以及对TRAF3自噬性降解的影响，以期阐明氯喹抑制FLS活化的分子机制，为氯喹治疗类风湿性关节炎的临床应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 细胞培养与处理类风湿关节炎滑膜细胞（MH7A）于重庆巴而思生物科技有限公司购买，采用RPMI⁃1640培养基（Gibco，美国）补充10%胎牛血清（AusGeneX，澳大利亚）和1%青链霉素（碧云天，中国）进行培养。……