邓晓芳 彭俊琴 陈历排 卢斌贵

广州医科大学附属肿瘤医院1内科二区，2医学影像科，3妇瘤科（广州510095）

卵巢癌是继宫颈癌及子宫内膜癌之后发生率居第三位的妇科恶性肿瘤，其死亡率一直居女性生殖道恶性肿瘤的首位［1］。早期卵巢癌经手术及化疗后，其5年生存率达80%～95%，而中晚期卵巢癌仅为20%～30%。癌细胞减灭术联合化疗是目前中晚期卵巢癌的标准治疗方案。尽管治疗手段不断发展，但中晚期卵巢癌患者的预后和死亡率仍未得到明显改善，原因在于化疗耐药和转移［2］。

糖蛋白丝甘蛋白聚糖（Serglycin）是一种小分子蛋白多糖，在造血细胞和内皮细胞中最早发现，参与炎症介质的储存和分泌［3-4］。最近有报道指出Serglycin参与多种肿瘤细胞的耐药和转移［5-6］，但Serglycin在卵巢癌中的作用鲜有报道。本研究拟在人卵巢癌SKOV3细胞株中，通过构建稳定干扰Serglycin低表达的细胞株，探究Serglycin与卵巢癌耐药及转移的关系，为阐明卵巢癌耐药及转移的分子机制和改善晚期卵巢癌的临床治疗效果提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料人卵巢癌细胞系SKOV3购于美国ATCC。培养基为RPMI⁃1640，含10%胎牛血清，将细胞置于5%CO2、95%饱和湿度的培养箱中培养。取对数期的细胞进行实验。Serglycin基因的shRNA干扰慢病毒购于上海吉凯基因。cDNA逆转录试剂盒及实时定量PCR试剂购于美国Fermentas公司。由华大基因合成引物。Serglycin、β⁃actin抗体购于美国Santa Cruz。Ecadherin、ZEB1/2抗体购于美国Cell Signal⁃ling公司。ECL化学发光检测试剂盒购于美国Pierce公司。顺铂（cDDP）购置美国Sigma公司。Transwell小室购置美国Corning公司。

1.2 构建敲低Serglycin稳定细胞系利用shRNA干扰技术，构建稳定敲低Serglycin基因的两株细胞系：SKOV3/shSerglycin1#和SKOV3/shSerglycin2#，及对照细胞株：SKOV3/shCon。……