开 悦 刘 虎 王文茜 宋苗苗 王玉冰 谢 赟 马艺源 唐 颖 宋向凤新乡医学院免疫学教研室新乡453003

肥胖是由遗传、饮食、生活方式和环境等多种因素相互作用而引起的一种综合征[1]。近年来肥胖人数在全球范围内逐年升高,免疫平衡失调是其发病机制之一[2]。脂肪是人体的重要组成部分,按分布部位的不同可将其分为皮下脂肪和内脏脂肪,它们的作用不完全一样,一般认为内脏脂肪的含量与代谢性疾病的关系更为密切[3-4]。IL-33是新发现的IL-1家族的细胞因子,诱导Th2细胞、ILC2细胞、Treg细胞、M2型巨噬细胞和嗜酸性粒细胞分泌IL-4、IL-5和IL-13[5-6]。近年来一些研究报道IL-33与肥胖发生的关系,但结果并不完全一致,而不同类型的白色脂肪组织内IL-33的表达情况还未见报道。本研究探讨在肥胖发生发展中IL-33的表达水平和意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 细胞株 小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪细胞)3T3-L1细胞株购于北京协和细胞资源中心。

1.1.2 实验动物 6～8周龄的C57BL/6雄性小鼠(22～25 g)购于北京维通利华实验动物技术有限公司。在恒定的环境条件下,12 h的明暗交替周期饲养,动物自由摄食及饮水。

1.1.3 试剂与仪器 高糖DMEM培养基购于美国Gibco公司,胰岛素购于江苏万邦生化医药股份有限公司,IL-33 ELISA试剂盒购于美国Biolegend公司,小鼠高脂饲料购于美国Research diets公司,Western blot所用抗体购于美国Abways公司和Proteintech公司,RT-PCR所用试剂盒购于日本TaKaRa公司。倒置显微镜购于日本Nikom公司,化学发光成像仪购于法国Vilber lourmat公司,实时荧光定量PCR仪(Thermo Fisher Scientific,Quant-Studio5)购于美国Thermo Fisher Scientific公司,酶标仪(SpectraMax iD3)购于美国Molecdar Devices公司。

1.1.4 基因引物序列……