刘丹，夏笔军，文思，何皎，叶理，宫灿仪，邱苗芳

1.南方医科大学皮肤病医院，广东 广州 510091; 2.广州市妇女儿童医疗中心，广东 广州 510623

皮炎、湿疹是由遗传、环境、内分泌、神经、感染等多种因素引起的表现为不规则性丘疹以及糜烂和水疱等的炎症性皮肤病，包括变应性接触性皮炎(allergic contact dermatitis,ACD)、湿疹和特应性皮炎等。Ⅳ型变态反应参与其发病机制。虎榆软膏为本院制剂，主治亚急性、慢性皮炎湿疹。为了进一步验证其疗效，本实验通过建立小鼠急性、慢性ACD模型，探索该药对皮炎、湿疹的治疗作用，并从免疫炎症角度探讨其作用机制，为临床开展应用虎榆软膏治疗皮炎、湿疹提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物、药物、试剂及仪器

实验动物：C57小鼠60只，雌性，7～8周龄，体重18～23 g[广东省医学实验动物中心，合格证号NO. 44007200027365，许可证号SCXK (粤) 2013-0002]，实验室通风良好，温度20～25 ℃，相对湿度40%～60%。

药物及试剂：虎榆软膏(批号20200302)、虎榆软膏阴性对照(批号20200302)、氢化可的松乳膏(批号20200228)，均由我院制剂室配制。2、4-二硝基氟苯(DNFB，阿拉丁，批号L1705138)；逆转录试剂盒(TaKaRa，批号AJ60795A)；qPCR试剂盒(TaKaRa，批号AJ61478A)，TNF-α、IL-1β、IL-6、IL- 4、IL-17引物(北京六合华大基因科技有限公司)。

仪器：高速冷冻离心机(5424R，Eppendorf)，旋涡振荡仪(VORTEX-5，Qilinberier)，千分尺(精密度0.001 mm，三量量具)，光学显微镜(CX31，OLYMPUS)，电子天平(MS-105，瑞士梅特勒)，打耳器(YLS-Q4，山东省医学科学院设备站)，小动物麻醉机(德国CK)，微量分光光度计(NANODROP ONE，Thermo scientific)，多功能皮肤屏障检测仪(MPA580，德国Courage and Khazaka公司)，RT-PCR仪(CFX Connect Real-time System，BIO-RAD)，荧光定量PCR仪(T100 Thermal Cycler，BIO-RAD)。

1.2 方法

1.2.1 急性、慢性ACD模型的建立与给药 将60只C57小鼠分为急性、慢性各5组，每组6只。分别为空白对照组、模型组、虎榆软膏组、阳性组、基质组。……