王景隆，全东群，莫清荣，冯建远，王 豪，曾 悦，任同伟，王玉旭，陈 樱，欧阳康，黄伟坚，韦祖樟

（1.广西大学动物科学技术学院 动物传染病与分子免疫学实验室，南宁 530005；2.广西农垦永新畜牧集团金光有限公司，南宁 530005）

猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）是一种能够使怀孕母猪流产、死胎以及仔猪、育肥猪生长缓慢、呼吸系统出现损伤为主要特征的高度接触性传染病[1-2]。该病于1987年在美国首次被发现，主要临床表现为母猪繁殖障碍和新生仔猪的呼吸道疾病，随后全世界范围内相继暴发该病[3]。PRRSV是一种单股正链不分节段的RNA病毒，其基因组包括至少10个开放阅读框，即ORF1a、ORF1b、ORF2a、ORF2b、ORF3、ORF4、ORF5、ORF5a、ORF6和ORF7[4-6]。根据基因组核苷酸序列及抗原性差异，将PRRSV分为两种不同的类型，即PRRSV1和PRRSV2[7]。2008年，美国学者分离到了1株在Nsp2的高变区有着131（111+1+19）个氨基酸的不连续缺失的毒株，将其命名为NADC30。2012年起，与NADC30具有相似性的PRRSV变异毒株（NADC30-like）在我国大部分地区流行[8]。有研究表明，目前正在广泛使用的商业化疫苗对NADC30-like病毒株仅能提供有限的免疫保护作用，而自然重组使得该病在临床上的防治更加困难[9-10]。本研究对广西某猪场采集到疑似PRRSV的肺脏组织进行检测，结果为阳性。随后利用PAM细胞从病料组织中成功分离出1株PRRSV毒株，并对其进行鉴定分析，为广西地区的PRRSV防控提供了借鉴意义。

1 材料与方法

1.1 病料及处理 病料样品为广西某猪场采集到疑似PRRSV的肺脏组织，剪碎研磨处理后用于病毒RNA的提取。

1.2 主要试剂TaqMix、RNase酶抑制剂、dNTP Mixture、M-MLV购自TaKaRa公司；MEM、新生胎牛血清、胰蛋白酶购自Gibco公司；PAM细胞由本实验室保存。……