贝力克孜·艾合坦木，阿不都亥力力·依马木

卡马西平是一种电压依赖性钠通道阻滞剂，临床上常用于治疗癫痫、三叉神经和舌咽神经痛、双相情感障碍等疾病，因其药效明确且价格低廉而成为临床最常用的经典抗癫痫药。其常见不良反应主要有头晕、头痛、嗜睡、疲劳、复视、胃肠道不适、肝损害、血小板和粒细胞减少以及皮肤过敏反应等。随着卡马西平的应用增多，其药物不良反应所致的皮疹成为人们关注的焦点 。

近年研究[1-3]发现，HLA在卡马西平所致的皮肤过敏反应发生及演变中发挥了极大作用。美国食品药品监督管理局也结合文献报道[4]推荐亚洲人群在使用卡马西平之前进行HLA-B*1502基因型筛查。亚洲不同国家或种族人群HLA-B*1502基因型与卡马西平引发的药疹相关性存在明显差别，但维吾尔族人群中卡马西平引发的药疹是否与HLA-B* 1502等位基因型相关尚未见文献报道，故本研究探讨新疆维吾尔族癫痫儿童出现卡马西平导致的皮肤不良反应与HLA-B*1502等位基因型的相关性。

1 对象与方法

1.1 对象 收集2017年1月至2019年12月在我院住院或门诊选用卡马西平单药治疗的维吾尔族儿童癫痫患者100例。纳入标准：(1)诊断为癫痫(诊断标准依据2014年国际抗癫痫联盟制定的癫痫实用性定义[5])，且服用卡马西平单药治疗;(2)如服用卡马西平后2周内出现过敏反应的，皮肤过敏反应由皮肤科医生进行诊断，排除其他原因引起过敏;(3)用药前肝肾功能指标正常，药物服用依从性高、耐受性好;(4)年龄1～18岁；(5)三代以内直系亲属均为维吾尔族;(6)家属签署研究知情同意书。排除标准：(1)卡马西平单药治疗中需要有其他药物联用;(2)合并有其他基础疾病;(3)与入组对象有亲戚关系。本研究方案已被新疆阿克苏地区人才项目伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 分组方法 将服用卡马西平后2周内出现过敏反应的患者分为观察组，未出现过敏反应的患者作为对照组。

1.2.2 标本采集 采集入组患者的外周静脉血约3 ml，置于EDTA抗凝的试管中4 ℃保存。用饱和氯化钠法提取DNA样本，测定DNA纯度和浓度后，将浓度调至30 ng/L，-40 ℃保存。

1.2.3 基因检测 本研究分别采用PCR和碱基序列测序技术(SBT)测定样本。PCR仪系美国应用公司ABI测序仪3500。基因组DNA提取全血试剂盒系芮宝生物科技公司生产。检测试剂盒SeCore系赛默飞公司生产。采用SYBR Green荧光特性和RT-PCR 定性检测HLA-B*1502基因。该试剂盒包括一对HLA-B*1502基因特异引物和一对内部控制基因引物，在检测过程中每一份样本必须同时测试两个独立的PCR，在PCR中监测PCR产物的变化，检测结果根据结合内部控制组数值判定是否为HLA-B*1502阳性样本。SBT是国际组织相容性工作组织公布的碱基序列测序分析法，具有分辨率高、直接得到实际基因型等特点。PCR-SBT法对所有DNA样本进行高分辨率的HLA基因B位点的确定基因型检测分析。

1.2.4 观察指标 比较两组患者HLA-B*1502基因型阳性率及基因频率，同时对检测出的每个单个等位基因进行基因频率总结。

2 结 果

2.1 分组结果 100例单药服用卡马西平的儿童患者中，卡马西平所致的皮肤不良反应发病率为3%。观察组3例，既往均无个人药物过敏史及家族药物过敏史，发生皮肤过敏反应前除服用卡马西平外，未服用其他任何药物;男1例，女2例;平均年龄(13.33±4.50)岁;临床表现为全身性的斑丘疹伴瘙痒，未出现皮肤黏膜水泡、破溃，属于轻型皮疹，均经皮肤科医生专科诊治后治愈;1例患者发生轻度肝功能损害，给予保肝治疗后恢复正常。对照组97例，均为服用卡马西平半年以上从未出现卡马西平相关不良反应者;其中男58例，女39例;平均年龄(10.57±4.66)岁。两组性别、年龄差异无统计学意义(均P>0.05)，具有可比性。

2.2 基因检测结果 基因检测结果显示，观察组HLA-B*1502基因型均阴性，其携带的B位点的实际基因型分别为HLA-B*4601、HLA-B*5001、HLA-B*1501、HLA-B*3801、HLA-B*1302、HLA-B*1801。对照组仅1例患者HLA-B*1502基因型阳性，阳性率1.03%，基因频率0.005。两组基因阳性率差异无统计学意义(χ2=0.031，P=1.000)。两组HLA-B单个等位基因的频率见表1。

表1 两组HLA-B单个等位基因的频率(n=200)HLA-B例数基因频率HLA-B例数基因频率HLA-B例数基因频率HLA-B例数基因频率27∶0730.01554∶0110.00515∶1840.02015∶0830.01548∶0130.01544∶0280.04008∶0150.02540∶0220.01037∶0140.02049∶0130.01546∶0150.02555∶0130.01555∶0210.00507∶0710.00552∶0120.01044∶0350.02515∶1710.00514∶0270.03515∶0190.04558∶0190.04515∶0210.00535∶0370.03551∶01310.15540∶0650.02515∶0710.00556∶0110.00557∶0170.03538∶0170.03515∶1110.00545∶0120.01027∶0520.01081∶0210.00540∶0110.00541∶0120.01035∶0180.04035∶0810.00538∶0210.00513∶0110.00550∶01100.05018∶0180.04040∶0310.00507∶0270.03513∶02100.05035∶0250.025

3 讨 论

癫痫是多种原因造成的反复发作性慢性脑部疾患，是小儿神经系统的常见病之一[6]。据WHO报告全球约5 000万癫痫患者，在世界范围内的患病率5.00‰～11.2‰；据中国抗癫痫协会统计数据显示，目前我国有900万例癫痫患者，而且每年还会有40万新发病例，我国0～14岁儿童癫痫的发病率为1.51‰，患病率为3.45‰[6]。临床上主要通过规范服用抗癫痫药来控制发作。卡马西平是经典一线抗癫痫药物，可作为多种痫性发作类型患者的首选药物。虽然卡马西平疗效肯定，应用广泛，但其皮肤过敏反应问题长期困扰着临床医生。

抗癫痫药物皮肤不良反应包括斑丘疹、药物超敏综合征以及严重危及生命性不良反应的史蒂文斯-约翰逊综合征(SJS)和中毒性表皮坏死松解症(TEN)。其中卡马西平的药物不良反应更严重，严重的药物不良反应会造成沉重的医疗负担，那么避免SJS/TEN的发生是抗癫痫治疗过程中的重大挑战之一。有文献[7-9]报道，抗癫痫药所致的皮肤不良反应与HLA-B*1502基因型有一定的相关性，HLA-B*1502等位基因型是HLA-B62亚型的一部分，其基因多态性与卡马西平的皮肤不良反应是近年关注的热点。Kim等[10]研究显示，亚洲人群HLA-B*1502等位基因型与卡马西平诱导的SJS相关。随后的众多文献报道也证实了这一点，来自马来群岛[11]、泰国[3]、中国大陆汉族人[12-13]、中国台湾地区汉族人[1]、中国香港[2]的亚洲人群中，HLA-B*1502基因型与卡马西平所致SJS/TEN存在很强的相关性。美国食品药品监督管理局也结合文献报道修改了卡马西平的说明书，建议亚洲人群在服用卡马西平前需进行HLA-B*1502等位基因检测[4]。然而，随后的研究结果与先前的结果相悖。在服用抗癫痫药过敏(包括卡马西平所致SJS/TEN)的日本患者中并没有发现携带HLA-B*1502基因型[14]，且在486名健康日本人中也未发现携带该基因[15]。Kim等[16]对24例韩国卡马西平诱导的皮肤不良反应患者(7例SJS综合征、17例药物超敏综合征)的研究中发现，7例SJS患者中仅1例HLA-B*1502等位基因型阳性。Alfirevic等[17]发现卡马西平所致SJS的欧洲患者中无一携带HLA-B*1502等位基因型。本研究未发现卡马西平所致SJS/TEN，仅有3例患者出现斑丘疹，而且HLA-B*1502基因型均阴性，对照组发现1例患者HLA-B*1502基因型阳性，两组HLA-B*1502基因型阳性率对比无统计学意义。因此，卡马西平所致SJS/TEN与HLA-B*1502基因型的相关性在不同人群间存在显著差异，需要进一步开展国家及种族卡马西平所致SJS/TEN与HLA-B*1502的相关性的研究。

研究[12,16,18-24]表明，卡马西平所致的药物不良反应除了HLA-B*1502基因型，还与多种HLA等位基因(包括HLA-A*3101、HLA-B*1518、HLA-B*5901、HLA-C*0704、HLA-B*5801、HLA-B*3503/B*4601、HLA-B*1511)、CYP3A4基因、MRP2基因、HSP70基因和促胃动素基因等相关。卡马西平所致的药物不良反应极其复杂，可能是多因素共同作用的结果。

有文献[13,25]报道，年龄、性别及所患疾病等因素对HLA-B*1502基因型的阳性率无显著影响。孔韦东等[13]发现，卡马西平相关的斑丘疹与HLA-B*1502基因型相关性并不显著。本研究出现斑丘疹相关基因型分别为HLA-B*4601、HLA-B*5001、HLA-B*1501、HLA-B*3801、HLA-B*1302、HLA-B*1801，与现有文献报道的基因型也不一致。

综上所述，卡马西平导致皮肤不良反应的患者携带HLA-B*1502等位基因型的情况几乎只见于某些亚洲人群，HLA-B*1502等位基因型阴性的患者也不能排除出现卡马西平诱发皮肤不良反应的可能。新疆阿克苏地区维吾尔族人群里卡马西平的皮肤不良反应发生率低，且不良反应发生病例属于斑丘疹，未发现与HLA-B*1502等位基因型的相关性，今后需要扩大样本量进一步研究。