曹建平，佘 兰，赵娟霞

0 引 言

胃癌在中国是死亡率较高的恶性肿瘤之一[1]。目前，分子靶向及免疫治疗已成为当前晚期胃癌治疗的主要方式。针对HER2、VEGF、EGFR、c-Met等分子靶向药物已取得一定疗效，但效果仍然有限[3]。故深入了解胃癌增殖和迁移的分子机制，对于寻找胃癌新的生物标志物及其潜在治疗靶点具有重要意义。

β-1，4-半乳糖基转移酶Ⅲ(β-1,4-galactosyltransferase III,B4GALT3)属于β-1，4-半乳糖基转移酶家族(B4GALT)，此家族因有不同的受体倾向分布于人体不同组织[4]，参与细胞增殖、分化、迁移、侵袭和免疫反应[5]，与恶性肿瘤的发生和进展有关[6]，但在胃癌中的生物学功能知之甚少。microRNAs(miRNAs)是一类调节RNA分子，通过靶向3′UTR中mRNAs的互补序列，导致翻译抑制或降解，调控细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡、血管生成和转移[7]，在胃癌中有助于阐明肿瘤发生的分子机制，并有望成为胃癌检测的肿瘤标志物[8-10]。目前关于胃癌中miR-27a-3p靶向调控4-半乳糖基转移酶Ⅲ(B4GALT3)表达的具体机制尚不明确。本研究旨在探讨miRNAs与B4GALT3的关系，寻找能调控B4GALT3的miRNAs，分析miRNAs和B4GALT3对胃癌发生发展的作用及机制，为胃癌的诊断与治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1材料人正常胃黏膜腺上皮细胞GES-1、胃癌细胞SGC-7901和人肾上皮293T 细胞均由南华大学肿瘤研究所保存。胃癌细胞MGC-803、BGC-823细胞由西北大学生命科学学院功能糖组学实验中心馈赠。miR-27a-3p mimic、mimic NC、miR-27a-3p inhibitor、inhibitor NC 均为中国广州市锐博生物科技有限公司产品。

1.2生物信息学分析通过miRwalk(链接：http://www.μmm.uni-heidelberg.de/apps/zmf/mirwalk/)、miRanda(链接：http://www.microrna.org/microrna/)和TargetScan(版本6.2，http://www.targetscan.org/)在线软件进行预测和分析B4GALT3的靶标miRNAs及其结合位点。

1.3荧光素酶报告基因载体的构建和双荧……