张礼堃，邹秉杰综述，宋沁馨，周国华综述

0 引 言

新型冠状病毒 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2)是一种单链正股RNA病毒，属于冠状病毒科，β病毒属(Betacoronavirus)[1]。SARS-CoV-2可以发生人际传播，且传播能力强于2003年出现的SARS-CoV[2]。其主要传播方式主要为接触传播和飞沫传播[3-4]。人体感染新型冠状病毒后，轻症患者会出现以发热、干咳为主的症状，重症患者多在发病1周后出现呼吸困难和(或)低氧血症，甚至发展为急性呼吸窘迫综合征及多器官功能衰竭等[5]。由于SARS-CoV-2的强传染性和致死性，使用快速、准确、便利的诊断方法对其进行检测是发现传染源、阻断疾病传播链进而防控疫情的关键。

常用的病原体检测方法有病原体培养、血清抗体检测、核酸检测等，其中病毒培养检测耗时数天，效率过低；血清抗体检测特异性较低[6]。因此临床上最普遍的检测手段是时间更短、特异性更强、灵敏度更高的核酸检测方法。目前已有多种SARS-CoV-2的核酸检测方法，包括聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)、环介导的等温扩增、CRISPR/Cas系统等[7-10]。其中PCR技术是最早发展起来的核酸扩增技术，通过高温变性、低温退火、引物延伸的多次循环可将靶标扩增上万甚至上亿倍。作为一种相对成熟的核酸扩增技术，PCR技术目前已被广泛应用于生命科学的多个领域[11-13]。

本综述对目前基于PCR原理检测SARS-CoV-2的方法进行了总结和展望。

1 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, rt-qPCR)

实时荧光定量PCR属于第二代PCR技术，可以对核酸进行定量检测。该方法利用核酸扩增时产生的扩增曲线来对其初始浓度进行定量计算，目前主要的方法包括荧光染料法和TaqMan探针法。……