林 敏，张红梅

(重庆大学附属三峡医院 药学部， 重庆 404000)

小胶质细胞作为中枢神经系统(central nervous system，CNS)的固有免疫细胞，是缺血性卒中发生后神经炎性反应的启动细胞和最主要的反应细胞。小胶质细胞独特的经典激活M1型和替代激活M2型两种极化形式，诱导小胶质细胞由促炎M1型向抗炎M2型极化有利于减轻缺血性脑损伤。白藜芦醇作为天然的抗炎物质，可调控小胶质细胞向M2型转化从而减轻急性缺血卒中后神经炎性反应，但具体机制尚不清楚。

研究证实，annexin A(ANXA1)是一种钙离子依赖的磷脂结合蛋白，富集于中性粒细胞、巨噬细胞和小胶质细胞等免疫细胞，在外周和中枢免疫系统中均发挥着重要的抗炎作用。ANXA1可促进氧糖剥夺的小胶质细胞向M2型转化，从而减轻神经元损伤[1]。目前，白藜芦醇对ANXA1的作用尚无报道，本研究通过体外构建氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation，OGD/R)模型，首次探讨白藜芦醇对OGD/R小胶质细胞ANXA1表达的影响，及ANXA1在白藜芦醇调控OGD/R小胶质细胞向M2型极化的可能作用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂：兔抗ANXA1抗体(Abcam公司)、兔抗β-actin抗体(CST公司)，HRP-conjugated Affinipure羊抗兔IgG和594-conjugated羊抗兔IgG(H+L)(Proteintech公司)，5%牛血清白蛋白、Prime ScriptTMRT with gDNA Eraser试剂盒(TaKaRa公司)和DME/F12培养基(Gibco公司国)、白藜芦醇(Sigma-Aldrich公司)，ANXA1相关慢病毒(上海吉凯生物技术公司)。

1.1.2 细胞：大鼠来源的小胶质细胞系N9(上海康朗生物科技有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 细胞分组及处理:将N9细胞随机分组，未经OGD/R处理组细胞：OGD/R(-)组，构建OGD/R模型细胞：OGD/R(+)组，经Res处理的OGD/R(+)细胞：OGD/R(+)+Res组，经Res及空载慢病毒LV-Scramble处理的OGD/R(+)细胞：OGD/R(+)+Res+LV-Scramble组，经Res及沉默慢病毒LV-Scramble处理的OGD/R(+)细胞：OGD/R(+)+Res+LV-Scramble组。

构建N9细胞OGD/R模……