鸡蛋溶菌酶单克隆抗体的制备与鉴定
2021-05-10刘成倩严华祥孙凤萍姚惠娟易建中
上海农业学报 2021年2期
李 红,刘成倩,严华祥,孙凤萍,高 骏,姚惠娟,易建中
(上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海201106)
溶菌酶(Lysozyme)又称为N-乙酰胞壁质聚糖水解酶、胞壁质酶,是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶[1],对革兰氏阳性菌的抗菌能力最强,也能抑制革兰氏阴性菌和真菌,还具有抗氧化能力。 溶菌酶作为一种生物体内的非特异性免疫因子,在抑杀病原体时不易产生抗药性,具有无毒、无害、无残留、抗菌谱广、活性稳定、安全性高等优良抗菌特性[2]。 溶菌酶不仅在生物体内有非特异性免疫功能,哺乳动物还可以通过乳汁将这种功能传递给幼崽,提高幼崽的抗病力;家禽通过蛋清传递给种蛋,提高胚胎发育的抵抗力。 溶菌酶在食品工业(防腐剂)[3-4]、医药(酶类抗菌药[5-6],抗病毒药[7-8])、饲料(替代抗生素[9-12])和生物工程(生物酶[13])等领域已经得到广泛运用,并有替代抗生素的趋势。
鸡蛋中的溶菌酶含量最高,占蛋清蛋白的3.5%,是提取溶菌酶的最佳来源[14-15]。 蛋清中的溶菌酶含量越高,酶活力越强,越有利于鸡蛋的储藏,因此测定鸡蛋蛋清中的溶菌酶对我国溶菌酶生产、禽蛋产品加工有重要的指导作用,其也是评定鸡蛋品质的重要参数之一。 目前,蛋清中溶菌酶的定量测定还没有一个较便捷的方法。 本研究通过制备溶菌酶抗体,旨在提供一种检测鸡蛋清中溶菌酶的方法。
1 材料与方法
1.1 实验动物和细胞系
SPF 级6—8 周龄雄性BALB∕c 小鼠购自复旦大学上海医学院;SP2∕0 细胞为本实验室保存。
1.2 主要试剂
弗……
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