李 露，刘晓茜，徐梦露，李莎莎，毛 迪，邓连宇

(西安医学院第一附属医院肾脏内科，西安 710077)

目前，全球范围内人口老龄化问题愈加凸显，随之而来的老年相关疾病给人体健康以及社会经济带来极大威胁，老年性肾功能减退严重影响了老年人的健康和生活质量。自然衰老过程中的老年性退行性改变是一个多因素、多途径的复杂的病理生理过程[1-2]，其发生涉及氧自由基的产生、细胞凋亡、血管内皮损伤、端粒酶活性降低等多种病理生理过程，机制复杂，尚未完全阐明[3-4]。近期有研究表明，老年性肾功能减退过程中也存在自噬，mTOR是细胞自噬的关键分子。褪黑素(melatonin)是松果体分泌的吲哚类内分泌激素，可通过降低氧化应激、调控自噬等在全身多种器官的保护中发挥重要作用，其作用机制尚不清楚[5]。本研究建立了自然衰老大鼠模型，旨在研究褪黑素能否通过mTOR信号通路调节自噬水平，从而减轻自然衰老过程中的肾脏损伤。

1 材料和方法

1.1 仪器和设备 光学显微镜、激光共聚焦显微镜(日本Olympus公司)；Western blot电泳仪及成像系统(美国Bio-Rad公司)。

1.2 动物和试剂 实验动物为健康雄性8周龄SD大鼠40只，由空军军医大学动物中心提供[许可证号：SYXK(陕)2019-001]。褪黑素(美国Sigma公司)；TUNEL试剂盒(美国Roche公司)；mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)、LC3B(可标记出LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ)、Beclin1、p62抗体(美国Sigma公司)；辣根过氧化物酶标记的山羊抗鼠和山羊抗兔IgG二抗(北京中杉金桥公司)；小鼠肌酐(Cr)ELISA试剂盒(上海振誉生物科技有限公司)；尿素氮(UN)ELISA试剂盒(上海泽叶生物科技有限公司)。

1.3 自然……