徐玉红 张慧雅 郑伟平 卢琪芸 阮雅文 陈君霞

卵巢癌是妇科常见恶性肿瘤，在女性癌症相关死亡中占5%～6%。每年卵巢癌的全球新发病例超过23万，且有≥14万女性因卵巢癌死亡［1］。尽管手术及化疗被广泛应用于卵巢癌治疗，80%的患者发展为化疗耐药并转移，最终导致死亡［2］。研究表明，多种长链非编码RNA（lncRNA）在卵巢癌中表达失调，可作为卵巢癌的潜在治疗靶点［3-5］。前列腺癌相关长链非编码RNA转录产物1（PCAT-1）是近几年才被发现的人类癌症相关分子，在多种肿瘤疾病中被证实具有致癌作用［6-8］。本研究旨在探讨PCAT-1在卵巢癌组织中的表达及抑制PCAT-1表达对卵巢癌恶性生物学功能的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 （1）标本与细胞株：收集2019年6月至2020年9月本院手术切除的卵巢癌组织20例，同时取癌旁正常组织20例，立即置于液氮保存，所有患者术前未进行任何辅助治疗，术后均经病理证实。该研究项目获本院医学伦理委员会同意，所有患者均于术前签署知情同意书。人卵巢癌SKOV3细胞株购自上海中国科学院细胞库。（2）主要试剂：胎牛血清，McCoy's 5A培养基，胰酶购自美国Gibco公司。TRIzol试剂、Lipofectamine 2000转染试剂购自invitrogen公司。逆转录试剂盒及荧光定量PCR试剂盒购自日本TaKaRa公司。引物序列、小干扰RNA（si-RNA）均由上海吉玛制药公司设计合成。CCK-8购自MCE（MedChemExpress）公司，Transwell小室、Matrigel基质胶购自美国Corning公司，蛋白提取试剂RIPA及蛋白酶抑制剂购自碧云天公司，PARP1及β-actin一抗购自santa cruz公司。

1.2 方法 （1）荧光实时定量PCR：利用TRIzol试剂提取卵巢癌组织样本中的RNA，取1 μg的总RNA利用逆转录试剂盒反转录为cDNA，使用荧光定量PCR试剂盒进行qPCR。……