孙锦辉，李春潮，范旋燕，黄 聪，全娟花* （.广东医科大学附属医院消化内科，广东湛江 5400；.北京大学深圳医院皮肤性病科/皮肤病研究所，广东深圳 58036）

结肠癌由遗传和环境因素相互作用引起[1]，目前早期癌可予内镜黏膜下剥离术治疗，中晚期癌首选根治性手术并辅以化疗，但肿瘤的复发转移以及耐药等问题使近30 年结肠癌的5 年生存率维持在50%～60%。近年来，肿瘤的靶向治疗可特异性作用于特定的分子，且对正常组织损伤较小，这为结肠癌的治疗提供了新的方向[2]。Gefitinib 是一种酪氨酸激酶受体抑制剂，有研究报道Gefitinib 对多种肿瘤有明显的抑制作用，而正常组织表现出良好的耐受性[3-4]。本研究主要通过体外实验探讨Gefitinib 对Caco-2 细胞增殖凋亡的影响及其潜在机制，为其应用于结肠癌的治疗提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂与仪器 Gefitinib(美国Sigma 公司)，人结肠癌细胞株Caco-2 购于中科院上海细胞库，胎牛血清FBS(乌拉圭Lonsera 公司)，RPMI1640 培养基(美国HyClone 公司)，100×青霉素/链霉素双抗(美国Gibco 公司)，胰蛋白酶含0.25% EDTA(美国Sigma 公司)，10×PBS 缓冲液(美国Solarbio 公司)，Cell Banker2冻存液(日本ZENOAQ 公司)，MTS(美国Promega公司)，AnnexinV-FITC/PI 细胞凋亡检测试剂盒(日本Dojindo 公司)，Texas RedTM-X Phalloidin 试 剂(美国Life Technologies 公司)，DAPI (美国 Vector Laboratories 公司)，JC-1 线粒体膜电位试剂盒、免疫染色固定液、免疫染色洗涤液、SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒(中国碧云天公司)，CETi Lysis Buffer(韩国Trans Lab 公司)，BCA 试剂盒(中国Genstar 公司)，0.2 μm PVDF 转印膜(美国Millipore 公司)，20×TBS(美国Solarbio 公司)，发光液(美国MILLIPORE 公司)，α-Tubulin(美国SANTA CRUZ 公司)，兔抗IgG-HRP、鼠抗IgG-HRP(美国Cell Signaling 公司)，p-p38、p38、p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、Caspase-3、PARP(美国Cell Signaling 公司)，超声细胞破碎仪(中国宁波新芝生物公司)，酶标仪(美国Thermo 公司)Azure c500(美国Azure Biosystems 公司)，荧光显微镜……