张素娥，何金花，李 娜，高丽娟，马红敏，郑 韬

石家庄市第二医院：1.神经内二科；2.内分泌科，河北石家庄 050051；3.河北省人民医院肝胆外科，河北石家庄 050051；4.石家庄辛集鑫苑中西医结合医院内科，河北石家庄 050051

脑卒中是临床上较常见的一种脑血管疾病，该病多发生于中老年人群，且已成为造成该人群死亡的首要原因，严重威胁患者的生活质量[1-2]。有研究显示，糖尿病是脑卒中的危险因素之一[3]。脑卒中合并糖尿病可造成患者水肿加重、梗死灶扩大，极大地增加了治疗的难度，且患者虽进行有效治疗，但预后不佳[4]。肥胖抑制素(Obestatin)是近年来在血液循环中发现的一种活性多肽，研究发现Obestatin具有降低胰岛素抵抗、刺激胰岛素分泌等多重生物学作用[5]。摄食抑制因子1(nesfatin-1)是一种多效能细胞因子，在调节能量代谢、糖脂代谢、减轻体质量等方面发挥重要作用[6]。然而，目前血清Obestatin和nesfatin-1的表达水平与脑卒中合并糖尿病的发病机制及其与患者认知功能的关系尚不完全清楚。基于此，本研究拟通过检测脑卒中合并糖尿病患者血清Obestatin和nesfatin-1的表达情况，探讨其水平与脑卒中合并糖尿病患者认知功能的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年11月至2020年5月在石家庄市第二医院确诊的脑卒中患者100例为研究对象，并根据是否合并糖尿病分为糖尿病组和非糖尿病组。糖尿病组43例，其中男25例、女18例，年龄35～65岁。非糖尿病组57例，其中男35例、女22例，年龄36～67岁。糖尿病组和非糖尿病组的性别构成、平均年龄、体质量指数(BMI)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、高脂血症和高血压患者比例之间比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；糖尿病组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平显著高于非糖尿病组(P<0.05)。见表1。

糖尿病组患者纳入标准：(1)确诊为脑卒中，并符合《中国2型糖尿病防治指南(2017年版)》中的相关诊断标准[7]；(2)患者及家属选择在本院接受治疗；(3)临床资料齐全者。非糖尿病组患者纳入标准：(1)符合《中国各类主要脑血管病诊断要点2019》中有关脑卒中的相关诊断标准[8]；(2)患者及家属选择在本院接受治疗者；(3)临床资料齐全者。排除标准：(1)同时患有心、肾等脏器功能不全者；(2)同时患有严重内分泌疾病者；(3)同时患有其他系统性疾病者。本研究经本院伦理委员会批准通过，所有标本采集均取得患者及家属知情并签署同意书。

1.2试剂与仪器 Obestatin和nesfatin-1酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒均购自上海通蔚生物科技有限公司(批号YB-K2807、YB-K2705)；TGL20M型离心机购自湖南凯达科学仪器设备有限公司；7180型全自动生化分析仪购自日本日立公司；本研究中其他化学药品均购自北京甘棠飞华生物科技有限公司。

1.3方法

1.3.1标本采集及保存 于清晨抽取所有受试者空腹状况下的静脉血5 mL，3 000 r/min(4 ℃)离心10 min分层后收集上层血清，置于-80 ℃冰箱中保存待测。

1.3.2血清Obestatin、nesfatin-1水平的检测 采用ELISA法检测各组研究对象血清Obestatin、nesfatin-1水平。严格按照各试剂盒使用说明书进行测定，其具体操作步骤如下：将已配制好的100 μL标准样品分别加入标准孔和空白孔中，37 ℃温育30 min后洗涤。然后将酶标板内液体弃去，拍干后向其中加入酶标试剂，在37 ℃温育30 min，洗涤后加入显色剂并混合均匀，使其进行显色。最后加入终止液，并测定其吸光度。

1.3.3生化指标检测 取出待测血清，在实验室用全自动生化分析仪测定TC、TG、HDL-C、LDL-C。

表1 两组一般资料的比较

组别nTC(mmol/L,x±s)TG(mmol/L,x±s)LDL-C(mmol/L,x±s)HDL-C(mmol/L,x±s)糖尿病组435.23±1.153.67±1.543.02±0.561.28±0.25非糖尿病组574.51±0.802.35±1.292.81±0.511.36±0.18t/χ23.6914.6591.9541.861P<0.001<0.0010.0540.066

1.4认知功能评定 采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)对受试者进行评价[9]。所有研究对象入院后由经过专业培训的神经内科医师对其进行问卷调查，该量表主要包括命名、视空间及执行能力、注意力、记忆、定向力、抽象、语言、延迟回忆8个维度，总分为30分，<26分为认知功能障碍，≥26分为正常，分数越高表示患者认知功能越好。

2 结 果

2.1各组血清Obestatin、nesfatin-1水平比较 糖尿病组血清Obestatin水平显著低于非糖尿病组(P<0.05)；血清nesfatin-1水平显著高于非糖尿病组(P<0.05)；MoCA评分显著低于非糖尿病组(P<0.05)。见表2。

表2 两组血清Obestatin、nesfatin-1水平的比较

2.2不同血清Obestatin、nesfatin-1水平患者认知功能的比较 分别以血清Obestatin、nesfatin-1的平均值(30.83 ng/L、6.89 mg/mL)将脑卒中合并糖尿病患者分组，其中高Obestatin组19例，低Obestatin组24例；高nesfatin-1组23例，低nesfatin-1组 20例。高Obestatin组患者MoCA评分显著高于低Obestatin组(P<0.05)；高nesfatin-1组患者MoCA评分显著低于低nesfatin-1组(P<0.05)。见表3。

表3 各组患者认知功能的比较(分，

2.3血清Obestatin、nesfatin-1与MoCA评分的相关性 Spearman相关分析结果显示，脑卒中合并糖尿病患者血清Obestatin水平与MoCA评分呈正相关，nesfatin-1水平与MoCA评分呈负相关(r=0.599，r=-0.358，P<0.05)。

2.4脑卒中合并糖尿病患者发生认知功能障碍的影响因素分析 以脑卒中合并糖尿病患者是否发生认知功能障碍为因变量(0=否，1=是)，血清Obestatin、nesfatin-1及TC、TG水平为自变量，采用多因素Logistic回归进行分析，结果显示，血清Obestatin低表达、nesfatin-1高表达均是影响脑卒中合并糖尿病患者发生认知功能障碍的独立危险因素(P<0.05)。见表4。

表4 脑卒中合并糖尿病患者发生认知功能障碍的危险因素分析

3 讨 论

脑卒中是由脑血管病变或大脑内血液循环出现障碍所致的一种慢性疾病，糖尿病是脑卒中发病的重要影响因素，研究显示，糖尿病患者脑卒中发病率是非糖尿病患者的2～5倍[10]。脑卒中合并糖尿病的主要临床表现为偏瘫、痴呆等，且患者认知功能障碍发生率较高，若未得到及时有效的治疗，对患者的康复造成极大影响[11-12]。流行病学研究显示，随着中国人口老龄化速度的加快，近年来脑卒中合并糖尿病的发病率呈逐年升高趋势，严重影响患者的生命健康安全[13]。因此，寻找新的疾病标志物并研究其对患者认知功能的影响具有重要的临床意义。

Obestatin是一种由23个氨基酸组成的多肽，该物质主要是由Ghrelin基因经翻译及修饰后产生[13]。相关研究显示，Obestatin的功能广泛，在全身各个系统中均可发挥作用，具有促进脂肪细胞分化、抑制食物摄取、抗炎等作用，并对神经系统、心血管系统具有重要影响[14]。有研究显示，Obestatin与多种疾病的发生、发展有关。王键等[15]研究发现，Obestatin在老年糖尿病胃轻瘫患者血清中表达水平升高，且与胃排空的时间密切相关，其表达水平可作为评估老年糖尿病胃轻瘫患者病情严重程度的临床指标。TOOSI等[16]研究发现，使用Obestatin可改善因酒精引起的后代空间记忆障碍，调节神经炎性反应，增加谷胱甘肽和总超氧化物歧化酶活性，保护神经功能等作用。本研究结果显示，糖尿病组血清Obestatin水平显著低于非糖尿病组(P<0.05)，提示血清Obestatin可能参与脑卒中合并糖尿病的发展进程。

nesfatin-1是一种分泌性多肽，主要来源于核组蛋白2，该物质广泛存在于脑干、下丘脑及脊髓的神经核团中，在能量代谢及摄食等方面具有重要作用[17-18]。有研究显示，nesfatin-1与多种疾病的发生及发展有关。徐海波等[19]研究发现，nesfatin-1在新诊断的2型糖尿病患者血清中表达水平升高，并可通过胰岛素信号通路影响糖脂代谢，进而参与该疾病的病理过程。石杰等[20]研究发现，脑卒中患者血浆nesfatin-1水平及神经功能缺损程度与其抑郁程度密切相关。本研究结果显示，糖尿病组血清nesfatin-1水平显著高于非糖尿病组(P<0.05)，提示血清nesfatin-1可能参与脑卒中合并糖尿病的发展进程。进一步分析显示，糖尿病组MoCA评分显著低于非糖尿病组(P<0.05)，且脑卒中合并糖尿病患者血清Obestatin水平与MoCA评分呈正相关(P<0.05)，nesfatin-1水平与MoCA评分呈负相关(P<0.05)。糖尿病患者机体内各生化指标常伴有异常，且其水平变化与患者病情有关。因此检测脑卒中合并糖尿病患者LDL-C、HDL-C、TC、TG水平具有重要意义。本研究结果显示，糖尿病组TC、TG水平显著高于非糖尿病组(P<0.05)，提示TC、TG水平异常与脑卒中合并糖尿病有关。本研究还发现，高Obestatin组患者MoCA评分显著高于低Obestatin组(P<0.05)，高nesfatin-1组患者MoCA评分显著低于低nesfatin-1组(P<0.05)，提示血清Obestatin、nesfatin-1水平与脑卒中合并糖尿病患者认知功能密切相关。上述分析显示，Obestatin、nesfatin-1及TC、TG水平与脑卒中合并糖尿病密切相关，多因素Logistic回归分析结果显示，血清Obestatin低表达、nesfatin-1高表达均是影响脑卒中合并糖尿病患者发生认知功能障碍的独立危险因素，提示监测两者表达水平，对评估脑卒中合并糖尿病患者认知功能有一定的临床价值。

综上所述，Obestatin水平在脑卒中合并糖尿病患者中明显降低，nesfatin-1水平明显升高，两者参与脑卒中合并糖尿病的发生及发展，且其表达情况与患者认知功能密切相关，提示血清Obestatin和nesfatin-1可用于脑卒中合并糖尿病患者病情的评估，但其具体的作用机制还有待深入研究。