制备并初步评价KGDS靶向活化血小板纳米钆对比剂
2021-04-27郭惠庄罗文峰余盛龙陈汉威
郭惠庄,罗文峰,余盛龙,李 莉,陈汉威
(广州市番禺区中心医院医学影像研究所,广东 广州 511400)
动脉粥样硬化血栓形成指在动脉粥样硬化缓慢发展过程中斑块突然破裂引起急性血栓形成,可能导致严重后果,如急性冠脉综合征、短暂性脑缺血发作和卒中。据统计,约每3例死亡事件中,即有1例死于动脉粥样硬化血栓形成[1]。分子影像学技术是近年来发展迅猛,与传统影像学技术相比,能于组织和细胞水平反映疾病的病理过程,动态显示动脉粥样硬化斑块结构及成分变化,并可用于判断预防和治疗效果。动脉粥样硬化发生发展中,血小板是血栓形成的关键,不仅与脉管血栓闭塞终点事件相关,也与斑块发展的早期阶段存在密切关联。对聚集或黏附血小板进行成像,可更好地显示粥样硬化斑块破裂形成血栓[2-4]。铁蛋白分子在生物体内普遍存在,具有纳米级球形空腔及很好的生物相容性,非常适于作为药物载体[5]。本实验尝试以去铁铁蛋白为载体,将MR对比剂装载于其内部,在其表面连接具有靶向活化血小板功能的赖氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Lys-Gly-Asp-Ser, KGDS)多肽,制备靶向活化血小板表面受体GPⅡb/Ⅲa的MR纳米对比剂(Gd-Afn-KGDS),并初步观察其体外靶向能力。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 去铁铁蛋白(Apoferritin,Sigma),异硫氰酸酯(FITC,Sigma),1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC,Sigma),N-羟基琥珀酰亚胺(NHS,Sigma),KGDS多肽(Abbiotec),二磷酸腺苷(ADP,Sigma),透析袋(截留分子量:8000~14000,源叶)。
1.2 仪器与设备 马尔文粒径分析仪(Malvern,Zetasizer Nano S90,英国),透射电子显微镜(FEI,Tecnai G2 F20,美国),荧光显微镜(Leica,DMi8-M,德国),蛋白定量仪(Thermo Fisher,NanoDrop 2000,美国),原子吸收光谱仪(Thermo Fisher,ICE 3500,美国);……
