王 维 郭 欣

金钱白花蛇来源于眼镜蛇科动物银环蛇（Bungarus multicinctus Blyth）的幼蛇干燥体，具有祛风、通络、止痉的功效，临床用于治疗风湿顽痹，麻木拘挛，中风口眼㖞斜，半身不遂，抽搐痉挛，破伤风，麻风等病症[1]。其含有蛋白质、脂肪、氨基酸、糖类，以及钙、磷、铁、锌等20 多种元素[2]。药理研究显示，金钱白花蛇具有良好的抗炎、镇痛、抗肿瘤作用[3]。目前，蛋白质常用化学测定手段主要有微量凯氏定氮法[4]，双缩脲试剂反应[5]，Folin-酚法（Lowry）[6]等。Folin-酚试剂是蛋白质含量测定最灵敏的方法之一，其原理是在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜离子结合生成复合物，Folin-酚试剂中的磷钼酸盐-磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和色氨酸残基还原，产生深蓝色（钼兰和钨兰的混合物），蓝色深度与蛋白的量成正相关[7]。此法操作简单迅速不需特殊的仪器设备，且灵敏度高，15min 就有最大的显色并可稳定数小时。因此，本研究采用Folin-酚试剂法测定金钱白花蛇粉末中蛋白质含量，以期为金钱白花蛇粉末中蛋白质提取、分离、药理活性等方面的深入研究奠定基础。

1 实验材料

1.1 仪器 UV-2600 紫外分光光度计（岛津公司）、HWS26-电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）、电子分析天平（瑞士梅特勒）。

1.2 试剂 牛血清白蛋白（中国食品药品检定研究院，供含量测定用，批号20190327）、氢氧化钠（天津市光复科技发展有限公司，批号970522）、钨酸钠（京华化工厂，批号970512）、钼酸钠（北京化学试剂公司，批号950912）、无水碳酸钠（北京化工厂，批号20150728）、蒸馏水（MILL-Q 纯水仪制备），其他试剂均为分析纯，购于北京化工厂。……