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丹参素经PI3K/Akt 信号通路改善血管性痴呆模型小鼠认知功能的机制研究

2021-04-27祁敏芳吴慧娟童军卫蒋永泼钱玲珠杨卫星徐挺立

浙江中西医结合杂志 2021年4期
关键词:小鼠剂量模型

祁敏芳 吴慧娟 童军卫 蒋永泼 钱玲珠 杨卫星 徐挺立

血管性痴呆是脑内长期缺氧和低灌注引起的严重认知功能障碍综合征[1]。脑血管疾病(如缺血性卒中、出血性卒中、脑缺血缺氧)是血管性痴呆的主要临床病因[2]。磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对细胞生长和存活等许多方面至关重要,其异常表达会导致多种生长因子和调节因子含量发生改变[3]。丹参素是丹参水溶性成分中的主要药效成分之一,具有改善循环、增强免疫及抗氧化等作用[4]。丹参素对血管性痴呆认知功能障碍的治疗效果目前还不清楚。本研究通过制备血管性痴呆小鼠模型,探讨丹参素对其作用机制,报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 60 只SPF 级昆明种小鼠,雌雄各半,体质量20~25g,购自重庆医科大学实验动物中心,动物生产许可证号:SCXK(渝)2019-0002,动物使用许可证号:SYXK(渝)2019-0029,动物质量合格证号:002008134。均饲养于清洁级动物房内(室温:20~25℃,相对湿度:50%~70%),动物自由取食、饮水,自动控制光照/黑暗交替(12h/12h)。本研究通过本院伦理委员会审查,符合动物伦理学标准要求。

1.2 药物 尼莫地平注射液(济川药业集团有限公司,规格:50mL:10mg,批号20191013);丹参素(原料药,纯度:99.99%,南京建成生物工程研究所,批号HT0611)。丹参素溶于生理盐水配制成浓度为1、2、3mg/mL 的溶液。

1.3 主要试剂与仪器 星形胶质源性蛋白(S-100β)酶联免疫吸附(ELISA)检测试剂盒、神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA 检测试剂盒(上海酶联生物科技有限公司,批号057458、094355);RIPA 裂解缓冲液(西安赫特生物科技有限公司,批号WB118);硝化纤维素膜(上海玉博生物科技有限公司,批号P88025);……

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