游丰锋 杨光勇 涂小华 何亚敏 喻良锦 李雨彤 李 灿 田维毅 何光志

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）多累及远端结肠，亦可遍及全部结肠[1]。肠黏膜屏障损伤及由此造成的肠壁通透性增高是UC 发病的始动因素和病情进展的核心环节[2]，肠道微生物群—宿主之间的相互作用被破坏等因素与UC 发生发展密切相关[3-5]。肠道益生菌是组成肠道黏膜屏障的重要部分，而肠道菌群失调与免疫功能异常则直接影响UC 的演变[6]。丙酸为嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila，A.muciniphila）代谢产物之一，具有免疫调节作用，并能将黏蛋白进行分解和再促合成，从而维持肠道黏膜屏障稳定。本研究通过肠杆菌基因间重复共有序列（ERIC）-聚合酶链式反应（PCR）和半定量PCR 技术分析保和丸对UC 模型小鼠肠道菌群多样性和A.muciniphila 菌的含量变化，并通过观察肠道组织病理切片从形态学改变分析肠黏膜屏障损伤和炎症预后及转归。

1 实验材料

1.1 动物 SPF 级6 周龄KM 小鼠40 只，雌雄各半，体质量（20±2）g，购自长沙市天勤生物技术有限公司，动物使用许可证号：SCXK（湘）2019-0014。小鼠以小组单笼喂养，自由进食和饮水，环境：湿度60%、温度25°C、12h/12h 的光照/黑暗周期。所有实验操作符合3R 原则（减少、替代、优化）给予人道关怀。本研究通过贵州中医药大学伦理委员会审核。

1.2 试剂与药品 右旋葡聚糖硫酸钠（dextran sulphate sodium，DSS，Sigma-Aldrich 公司，批号H02J9 B62777）；保和丸（北京同仁堂，批号18081639）；美沙拉嗪（莎尔福公司，注册证号H20171358，批号17G27518L）；粪便基因组DNA 提取试剂盒[天根生化科技（北京）有限公司，批号S8114]；快捷型琼脂糖DNA 回收试剂盒Ⅱ型（北京百泰克生物公司，批号20170214）；……