许海梅 李永超 刘海珊 廖雪霞 张裕照

海南儋州市人民医院消化内科， 儋州 571179

AP是常见的消化系统疾病，轻症患者病情较轻，可自愈，而重症AP(SAP)病情进展迅速、并发症多、预后较差，给临床治疗造成了极大的困难。因此，如何对SAP进行早期诊治和预后判断是当前研究的热点问题。微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一种由21～25个核苷酸组成的非编码RNA分子，通过转录后水平调控基因表达，参与AP的发病过程[1]。研究表明，miR-148a-3p及miR-551b-3p在AP时异常表达，其与AP患者的发病及病情严重程度密切相关，是AP预后监测、靶向治疗的潜在生物学标志物[2-3]。本研究通过检测AP患者血清miR-148a-3p及miR-551b-5p的表达水平，分析其判断SAP患者预后的价值，以期为SAP的早期救治提供指导。

资料与方法

一、一般资料

选取2017年1月至2020年9月间儋州市人民医院收治的152例AP患者，其中男性95例，女性57例，年龄27～68(50±11)岁。根据病情严重程度分为MAP组(70例)、MSAP组(40例) 和SAP组(42例)。另根据42例SAP患者的预后情况，分为生存组(25例)和死亡组(17例)。纳入标准：(1)符合中国急性胰腺炎诊治指南(2014)AP诊断及分级标准[4]；(2)发病入院时间<72 h。排除标准：(1)合并严重心、肝、肾、呼吸系统疾病及恶性肿瘤者；(2)已接受外院治疗后转诊来院者。另选取同期50例体检健康者作为对照组，其中男性34例，女性16例，年龄30～65(51±10)岁。本研究通过医院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

二、血清 miR-148a-3p及miR-551b-5p表达检测

所有AP患者于发病当天(对照组于体检时)采集空腹静脉血5 ml，置于无抗凝剂的离心管中，离心分离血清，采用ABI 7500型荧光定量PCR仪进行实时荧光定量PCR。miR-148a-3p正向引物序列为5′-AGATCGCATCATCGATAGAC-3′，反向引物序列为5′-GATAGCCTGTACGTGCAGCT-3′；miR-551b-5p正向引物序列为5′-GACTAGCTGCAGCGTAGTAG-3′，反向引物序列为5′-ACTTCAGATGCATGCACATG-3′；内参照U6正向引物序列为5′-CTGAGTCACTAGCTAGA-3′，反向引物序列为5′-ACTGTGCAGCGTAGCAT-3′。PCR反应条件：95℃预变性10 min、95℃变性15 s、60℃复性60 s，45个循环。通过仪器自带软件获取Ct值，采用2-△△Ct公式计算miR-148a-3p及miR-551b-5p的相对表达量，每个样品设3个复管，取均值。……