朱 琳,潘孝华,孙 磊,何 静,3,肖 兰,颜士杰

(1.安徽医科大学第二附属医院妇产科,合肥 230601;2.安徽医科大学第一附属医院妇产科,合肥230020;3.安庆市立医院妇产科,安庆 246003)

近期研究证实，卵巢癌的发生、发展与机体免疫系统失衡密不可分，免疫疗法在卵巢癌中展示了良好的临床应用前景[1-2]。大量实验和临床报道均证实，干扰素具有抗肿瘤作用，可明显延长肿瘤患者无进展生存期，而单一免疫疗法不能彻底抑制肿瘤生长。免疫疗法联合化疗药物可实现对肿瘤的协同抑制，推进其在肿瘤治疗中的应用。Ⅲ型干扰素(IFN-γ)是一组新型干扰素，主要包括IL-29、IL-28A及IL-28B，其可通过激活细胞信号通路发挥抗病毒、抗增殖、抗肿瘤和免疫调节作用[3]。Ⅲ型干扰素结构与Ⅰ型干扰素相似，功能却较Ⅰ型干扰素强，且需与受体结合才能起效，这一特点可减少常用白介素导致的发热、疲劳不适等不良反应[4]。研究证实，IL-28B可增强顺铂对头颈部肿瘤细胞的毒性作用[5]，目前关于IL-28A与卵巢癌发生及IL-28A联合化疗抗肿瘤的研究均未见报道。本研究拟探讨IL-28A增加顺铂对卵巢癌细胞毒性作用及可能机制，为研发基于IL-28A的卵巢癌免疫化疗疗法提供基础理论支持。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要试剂 顺铂(山东齐鲁制药)，重组人IL-28A(rhIL-28A)、IL-28A及IL-10R2兔多克隆抗体(美国Abcam)，MICA(H-300)兔多克隆抗体(美国Santa Cruz);Annexin V-FITC试剂盒(南京凯基)，Trizol试剂(美国Invitrogen)，逆转录试剂盒、SYBR Green Master Mix(日本TaKaRa)，CCK-8及LDH检测试剂盒(上海碧云天)，抗PE免疫磁珠(德国美天妮)，IL-28A ELISA试剂盒(美国R&D)。

1.1.2 组织样本 选取2017年1月至2018年9月就诊于安徽医科大学第一附属医院妇产科且均经病理学诊断为卵巢癌的患者53例，FIGO分期：I、II期20例，III、IV期33例。……