李席席，李芳, ，康怀彬, *

1. 河南科技大学食品与生物工程学院（洛阳 471023）；2. 食品加工与安全国家级实验教学示范中心（洛阳 471023）

氨苄青霉素（AMP），又称氨苄西林，是一种β-内酰胺类抗生素，通过抑制胞壁黏肽合成酶，加速破坏细菌的细胞壁，最终致使细菌膨胀裂解[1]。氨苄青霉素具有耐酸不耐酶、杀菌活性强、低毒性和广谱廉价等优点[2]，经常被用于治疗动物呼吸道、尿道、肠胃系统、奶牛乳房炎等疾病，被广泛应用于养殖产业中[3]，因此造成动物源性食品中氨苄青霉素残留的问题[4]。长期食用含有氨苄青霉素残留的动物源性食品（乳制品、肉类、水产品、蛋类、蜂蜜等）会增强机体内细菌的耐药性，加重对肝肾等功能的损害[5]。因此许多国家和组织都对动物源性食品中氨苄青霉素的添加量进行严格控制。欧盟药典规定动物源性食品中AMP≤4 μ g/kg[6]，美国规定牛奶中AMP≤10 μ g/kg[7]，中华人民共和国农业部在2002年修订颁布的《动物性食品中兽药高残留限量》中规定动物性食品中AMP≤50 μ g/kg，并限制牛奶中AMP≤10 μ g/kg[8]。用于检测氨苄青霉素残留的方法有很多，常用方法主要有微生物法、仪器分析法、免疫分析法和生物传感检测[9]。

1 微生物法（MIT）

微生物检测法主要是依据抗微生物药物对特异性微生物的代谢过程有抑制作用和生理作用[10]，从而对样品中抗生素残留进行定性或定量检测[11]，通过观察培养基上抑菌圈的大小进行评估[12]。微生物法主要包括纸片（PD）法、氯化三苯基四氮唑（TTC）法和杯碟（CP）法等。

1.1 纸片（PD）法

嗜热脂肪芽孢杆菌纸片扩散法通常被用来监测微生物生长是否被抑制，抗生素存在时，纸片周围会出现一圈透明的抑菌圈，根据抑菌圈的大小推算待测样品中抗生素浓度的大小。……