■林 昊 贺海莲 王静鸽 张振明 陈凌云 丁保安

（青海大学农牧学院，青海西宁810016）

在对禽类的遗传研究中，禽类通过母体提供给子代的有益部分比哺乳动物高，主要从母体传入蛋中供给子代营养物质（Ban 等，2004）。鸡蛋品质主要受饲粮营养组成、遗传、品种、饲养管理、母鸡生理状况等因素影响，并且禽类亲代日粮营养影响子代肠道的生长发育（俸艳萍，2007）。因为胚胎发育必需的营养成分主要来自母体，母体的营养状况将决定种蛋内营养素的含量，而种蛋营养成分的平衡将会直接影响胚胎能否正常发育，以及影响到胚胎的存活或子代早期的正常生长发育，合理的母体营养能保证胚胎期的正常发育和雏鸡的生长（赵素梅等，2007）。

精氨酸是肉鸡日粮中第五大限制性氨基酸，由于家禽的体内缺乏合成精氨酸的尿素循环，不能直接合成精氨酸（Murakami 等，2014），并且精氨酸是家禽生长发育所必需的营养物质，精氨酸有着合成蛋白质、促进生长、羽毛形成等生物功能（Wertman，2012）。

海东鸡处于青藏高原地区，产于青海省海东地区而得名。海东鸡有着耐粗饲、适应性强、觅食能力强等特点，适合在高寒生态环境养殖。但是针对海东鸡母代与子代胚胎期营养代谢和肠道功能研究仍处于空白。鉴于此，本试验以海东鸡为研究对象，为高海拔地区母代营养对子代生态适应的生物学机制提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用精氨酸从河北裕隆祥生物科技有限公司购置（纯度≥99%）。

1.2 试验动物及日粮

试验动物为165 只体重相近的40 周龄海东鸡（来自青海省互助县松多养鸡场），基础日粮组成及营养水平见表1。

1.3 试验设计与饲养管理

试验采用单因素试验设计，将165 只种鸡（公母比例1∶10）分为5 个组（每组3 个重复），分别用0.10%、0.30%、0.50%、0.70%和0.90%精氨酸替代麸皮，互为对照组。试验时间为预试期14 d，正试期44 d，自由采食和饮水，每日光照为16 h，统计产蛋数和产蛋重。到第44 d结料，称出剩余料。

1.4 样品采集

1.4.1 血样的采集

在种鸡饲养试验结束后，选取由同一批次种蛋孵化7 日龄雏鸡作为试验组，每个重复随机抽取1 只7 日龄雏鸡进行心脏采血。采集血液约5 mL 在抗凝血管中，进行血常规的测定；采集7～9 mL 的血液于促凝血管中，室温放置，防止摇晃，然后用高速离心机3 500 r/min 离心10 min，分离血清于2 mL Eppendorf管中，保存于-80 ℃冰箱待测。血清总胆固醇（TC）、葡萄糖（GLU）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、三酰甘油（TG）、生长激素（GH）、胰岛素（INS）含量和胰高血糖素（GC）的含量采用瑞士帝肯IF50型半自动生化分析仪测定，试剂盒购买于江苏酶标生物科技有限公司。

表1 基础日粮组成与营养水平（风干基础）

1.4.2 肠道样品采集

按每个重复组随机选取1 只7 日龄雏鸡，采集十二指肠、空肠、回肠肠段。

1.5 数据处理

用SPSS 22.0 软件进行数据统计及线性分析，采用单因子方差分析，用Duncan's 法进行多重比较，以P＜0.05作为显著性差异判断标准，结果均以“平均值±标准差”表示。

精氨酸添加水平的线性和二次线性效应采用正交多项式进行分析，以P＜0.05 作为显著性差异判断标准。

2 结果与分析

2.1 不同精氨酸水平母鸡日粮对海东母鸡生产性能和7 日龄雏鸡体重的影响（见表2）

表2 不同精氨酸水平母鸡日粮对海东鸡母鸡生产性能和7日龄雏鸡体重的影响

由表2 可知，母鸡日粮精氨酸水平对母鸡产蛋率、料蛋比和7 日龄雏鸡体重有显著影响（P＜0.05）。产蛋率0.30%组显著高于与0.50%组（P＜0.05），其他各组间没有显著差异（P＞0.05）；料蛋比0.70%组显著高于0.10%组和0.30%组，0.50%组和0.90组显著高于0.30%组（P＜0.05），其他各组间差异不显著（P＞0.05）；7 日龄雏鸡体重0.10%组显著高于0.70%组和0.90%组，0.30%组和0.50%组显著高于0.90%组（P＜0.05），而其他各组间没有显著差异（P＞0.05）。海东鸡产蛋率随精氨酸添加水平升高呈线性降低（P＞0.05），雏鸡体重随精氨酸添加水平升高呈线性降低（P＜0.05）。

2.2 不同精氨酸水平母鸡日粮对7 日龄雏鸡肠道的影响（见表3～表4）

由表3可知，虽然母鸡日粮中添加不同梯度的精氨酸对7 日龄雏鸡十二指肠重量、空肠重量和长度、回肠重量和长度无显著影响（P＞0.05），但十二指肠的长度有显著的变化，0.50%组和0.70%组显著高于0.90%组（P＜0.05）。

表3 不同精氨酸水平母鸡日粮对7日龄雏鸡肠道重量及长度的影响

表4 不同精氨酸水平母鸡日粮对7日龄雏鸡肠道绒毛长度和隐窝深度的影响（μm）

由表4 可知，母鸡日粮添加0.50%精氨酸对子代十二指肠绒毛长度、十二指肠隐窝深度、空肠绒毛长度、回肠隐窝深度和回肠绒毛长度有明显影响（P＜0.05）。0.50%组十二指肠绒毛长度显著高于0.10%、0.30%组和0.90%组（P＜0.05），0.50%组和0.70%组无显著差异（P＞0.05）；0.50%、0.70%组和0.90%组十二指肠隐窝深度显著高于0.10%组和0.30%组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）；0.30%、0.50%组和0.70%组在空肠绒毛长度上明显高于0.10%组和0.90%组，0.90%组显著高于0.10%组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）；在空肠隐窝深度上，0.70%组显著高于0.10%、0.30%组和0.90%组，0.10%组和0.50%组显著高于0.30%组和0.90%组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）；0.30%、0.50%组在回肠绒毛长度上显著高于0.10%组和0.70%组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）；0.50%组和0.90%组在回肠隐窝深度上显著高于0.10%、0.30%组和0.70%组，0.10%组和0.70%组显著高于0.30%组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）。回肠的绒毛长度和隐窝深度随精氨酸添加水平升高呈线性升高；十二指肠绒毛长度表现出显著的二次剂量依赖关系（P=0.007），回归方程分为y=-134.319x2+150.464x+666.764(R2=0.066)，经计算得出，添加量为0.56%时，十二指肠绒毛长度达到最大值。十二指肠隐窝深度表现出显著显著的一次线性（P=0.026）或显著的二次剂量依赖关系（P＜0.001），回归方程分别为y=49.764x+89.978(R2=0.111)；y=-29.364x2+49.764x+89.978（R2=0.124）经计算得出，添加量为0.84%时，十二指肠隐窝深度达到最大值。空肠绒毛长度表现出显著的二次剂量依赖关系（P=0.012），回归方程为y=-270.592x2+316.423x+582.413（R2=0.264）计算得出，添加量为0.58%时，空肠绒毛长度达到最大值。

2.3 不同精氨酸水平母鸡日粮对7 日龄雏鸡血清生化指标的影响（见表5）

由表5 可知，母鸡日粮添加0.30%精氨酸对雏鸡TG、TC、HDL、GLU 和INS 有 显著影响（P＜0.05）。0.70%组的TG 含量显著高于其余各组（P＜0.05），0.50%组TG 含量显著高于0.30%组和0.90%组（P＜0.05），0.90%组TG 含量显著高于0.30%组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）；TC 含量每个组之间都有显著差异，其中0.70%组TC 含量最高，0.10%组含量最少（P＜0.05）；LDL 含量0.30%组显著高于0.50%组和0.70%组（P＜0.05），其他各组间差异不显著（P＞0.05）；HDL 含量0.30%组显著高于0.10%、0.50%组和0.70%组（P＜0.05），0.90%组HDL含量显著大于0.10%组和0.70%组（P＜0.05），0.50%组HDL含量显著大于0.10%和0.70%组（P＜0.05），0.10%组HDL含量显著大于0.70%组（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）；GLU 含量0.30%组显著高于其他各组（P＜0.05），0.10%、0.50%组和0.70%组差异不显著（P＞0.05），GH 含量0.30%组显著高于0.50%和0.70%组（P＜0.05），其他各组间差异不显著（P＞0.05）；INS含量0.10%组显著高于0.30%组和0.70%组（P＜0.05），GC含量0.10%组显著高于0.50%、0.70%组和0.90%组（P＜0.05），0.10%组和0.30%组无显著性差异（P＞0.05），0.50%、0.70%组和0.90%组无显著性差异（P＞0.05）；各组TC含量表现出显著的一次线性（P=0.028）或显著的二次剂量依赖关系（P=0.015），回归方程分别为y=156.275x+701.559（R2=0.321）；y=-501.028x2+657.303x+616.384（R2=0.506）经计算得出，添加量为0.655 9%时，TC 含量达到最大值。各组GLU 表现出显著的一次线性（P=0.006）或显著的二次剂量依赖关系（P＜0.001），回归方程分别为y=-1.105x+5.396（R2=0.455）；y=-3.597x2+2.491x+4.785（R2=0.724），经计算得出，添加量为0.346 2%时，葡萄糖含量达到最大。各组GC 含量表现出显著的一次线性（P＜0.001）或显著的二次剂量依赖关系（P＜0.001），回归方程分别为y=-1.3x+5.434（R2=0.752）；y=0.05x2-0.486x+12.26（R2=0.755）经计算得出，添加量为4.86%时，TG 含量达到最大。

表5 不同精氨酸水平母鸡日粮对7日龄雏鸡血清生化指标的影响

3 讨论

3.1 母鸡日粮中添加不同梯度精氨酸对母鸡生产性能和子代雏鸡体重影响

精氨酸对动物的生产性能的影响主要体现在对采食的影响，袁超（2016）在精氨酸对蛋鸡采食研究中发现，饲料中添加一定水平的精氨酸可提高蛋鸡的料蛋比，合适的精氨酸水平有着高采食量、产蛋率和低的料蛋比，本试验与袁超（2016）研究结果基本一致，母鸡日粮添加0.30%精氨酸对提高母鸡生产性能效果显著，并有较高的产蛋率。雏鸡刚出壳时，对碳水化合物以及氨基酸的利用功能尚不发达，母体营养与胚胎发育环境对鸡出生后的摄食、生长、能量平衡等均具有影响（Youssef 等，2016），合理的精氨酸水平能对种鸡生产性能、繁殖性能、免疫反应和基因表达有明显的影响（Lazier 等，1994），并且能增强抗氧化性能，对雏鸡的生长发育起到重要的作用（李国俊，2019），本试验中添加0.10%精氨酸能显著增加子代雏鸡的体重。动物机体精氨酸主要有3个来源：一是来源于饲料，其中饲料中大约有40%的精氨酸在小肠内直接分解消化，这也是精氨酸的主要来源；二是来源于与机体的蛋白质周转代谢；三是来源于机体内的尿素循环（袁超，2016），由于家禽的体内缺乏合成精氨酸的尿素循环，不能合成精氨酸，需要在日粮中添加精氨酸（Murakami等，2014）。

3.2 母鸡日粮中添加不同梯度精氨酸对子代雏鸡肠道发育的影响

母鸡日粮的不同水平精氨酸能引起3日龄到14日龄雏鸡肠道基因表达的变化（Duan 等，2015）。而雏鸡肠道的早期发育和脂类物质的消化吸收与种鸡日粮营养成分有关，造成雏鸡从出壳后早期肠道基因表达不同与雏鸡肠道的早期发育和脂类物质的消化吸收有关（Rebel 等，2006）。母体日粮影响雏鸡肠道的基因表达，从而影响雏鸡的新陈代谢、营养物质的消化与吸收、肠道形态发育和肠道免疫系统的形成（Ogura 等，2005）。禽类在孵化后不久肠道就会发生剧烈的变化，肠道器官的重量增加的更快，孵化后的雏鸡肠道生长具有较高的优先权，而每个肠道的重量和长度发育的时间是不一样的，其中十二指肠发育比空肠、回肠和盲肠较早，与Uni 等（1999）研究结果一致，本试验在种鸡日粮中添加0.70%精氨酸的7 日龄雏鸡的十二指肠长度发育较好。

3.3 母鸡日粮中添加不同梯度精氨酸对子代雏鸡肠道绒毛长度和隐窝深度的影响

良好的肠道形态结构是动物养分吸收和正常发育所需的必要条件，肠道的隐窝深度和绒毛长度是衡量肠道吸收生理功能的重要指标，肠道绒毛是吸收营养物质的主要部位，隐窝深度反映绒毛完整结构，隐窝深度越深，绒毛的吸收功能越完善，反之，隐窝深度越浅，绒毛的吸收功能欠缺（张玉仙等，2014）。本试验结果表明，在母鸡日粮添加0.50%的精氨酸能显著改善绒毛长度和隐窝深度，这与俸祥仁等（2019）研究一致。研究表明，精氨酸能够改善使十二指肠、空肠、回肠肠道的绒毛长度和隐窝深度，从而提高雏鸡肠道对营养物质的消化吸收功能。

3.4 母鸡日粮中添加不同梯度精氨酸对子代雏鸡血清生化指标的影响

血液中TG、TC、HDL含量和LDL含量主要是反映机体脂质代谢水平的指标，血液中TC 的主要合成转运体是HDL 和LDL，对TG 在机体平衡起到重要的作用。本试验中添加0.30%的精氨酸血清TG 含量最低，并且LDL 和HDL 含量高于其他试验组，精氨酸能够降低血液中TG 的含量，促进脂肪代谢，加快TG 的分解与利用，为雏鸡早期发育提供更多能量，这与高天（2017）的研究基本一致。禽类GLU 的主要作用是起到氧化功能，也是氨基酸和维生素C等营养物质合成的前提（Braue等，2008）。Ding等（2016）研究表明，GH 能促进脂肪的分解和促进氨基酸合成蛋白质，并且精氨酸具有调节脂肪的作用。与上述试验结果一致，本试验中添加0.30%精氨酸7 日龄雏鸡血清生化指标有着最高的葡萄糖和生长激素含量。

4 结论

母鸡日粮中不同水平精氨酸影响不同，其中添加0.10%精氨酸（即日粮精氨酸水平为0.96%）能增强子代雏鸡体重；从生产性能、肠道指标以及血清生化指标来看，母鸡日粮中添加0.30%和0.50%精氨酸（即日粮精氨酸水平为1.16%和1.36%）对海东鸡子代雏鸡肠道形态和血清生化指标影响改善最佳。