从免疫失衡研究补阳还五汤干预脓毒症大鼠心肌损伤的机制

2021-04-15梁志奇

福建中医药 2021年3期

关键词：模型

吴晖，邵丹，梁志奇，吴丹

（福建中医药大学附属人民医院，福建福州350004）

脓毒症全球发病率约29.5%并呈上升趋势［1］，每年大约530万例患者死于严重脓毒症［2］。心脏是脓毒症最常受累的脏器之一，合并心肌损伤可加重脓毒症病程进展，增加脏器衰竭和死亡风险［3］。前期研究发现，补阳还五汤能改善脓毒症患者免疫抑制状态，减轻脓毒症患者心肌损伤［4］，但具体机制尚不清楚。本研究旨在从免疫失衡及炎症损伤角度观察补阳还五汤对脓毒症大鼠心肌损伤的影响，并探讨其可能的作用机制。

1 实验材料

1.1 实验动物20月龄SPF级雄性SD大鼠120只，体质量（350±30）g，购自上海市计划生育科学研究所实验动物经营部，许可证号：SCXK（沪）2018-0006。所有大鼠实验前适应性喂养1周。

1.2 实验药物补阳还五汤组成：黄芪120 g，当归6 g，赤芍5 g，川芎3 g，桃仁3 g，红花3 g，地龙3 g，由闽候上街致诚医药商店提供，浓煎成含原生药1 g／mL，过滤除菌分装，4℃保存备用。

1.3 实验试剂DMEM基础培养基（美国Hyclone公司）；大鼠CD4、IL-4、IFN-γ抗体（美国Biolegend公司）；白细胞刺激剂、细胞分离液、磷酸盐缓冲液（美国BD Pharmingen公司）；PMA工作液（大连美仑生物技术有限公司）；大鼠肿瘤坏死因子α（TNF-α）、干扰素γ（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素10（IL-10）、肌钙蛋白I（cTnI）、脑尿肽（BNP）ELISA检测试剂盒（上海江莱生物科技有限公司）。

1.4 实验仪器CO2培养箱（美国Thermo公司）；倒置显微镜（日本NIKON公司）；移液器（德国eppendorf公司）；B320A离心机（中国白洋）；流式细胞仪（FACSCalbur）；酶标仪（美国伯乐公司）；DHG-9091A干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）。