大黄素对自身免疫性甲状腺炎小鼠的作用机制研究*
2021-04-14张国平李攀胡通海吴可人
张国平,李攀,胡通海,吴可人
(1.嵊州市中医院 外二科,浙江 嵊州312400;2.浙江中医药大学附属第一医院肝胆外科,浙江 杭州310000)
自身免疫性甲状腺炎(autoimmune thyroiditis,AT)主要是由免疫功能紊乱、环境及遗传等因素综合作用导致的自身免疫性疾病,是细胞免疫与体液免疫共同作用的结果[1-3]。AT 发病率不断上升,严重影响人们生活质量[4-5]。近年来,临床上针对AT 主要采用免疫抑制剂、糖皮质激素等治疗,但其效果并不十分理想,且对机体免疫功能造成较大损害[6]。而大黄素属一种蒽醌类衍生物,具有一定的免疫抑制作用。因此,本文研究旨在探讨大黄素治疗AT 小鼠的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验动物
60 只SPF 级昆明小鼠,雌性,适应性饲养1 周,湿度(55±10)%,温度(23±2)℃,自由饮食,购自辽宁实验动物中心,动物生产许可证号:SCXK2017-0001,动物使用许可证号:SCXK2017-0008。
1.2 主要试剂和仪器
大黄素(南京景竹生物科技有限公司,纯度98%),小鼠甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody, TGAb) 和甲状腺过氧化物酶自身抗体(thyroid peroxidase autoantibody, TPOAb)酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒(上海广锐生物科技有限公司)。Bio-Rad酶标仪(美国伯乐公司),流式细胞仪(美国BD公司)。
1.3 动物模型的复制与分组
1.3.1 模型复制取10 mg 猪甲状腺球蛋白溶于5 ml 水,将其与完全弗氏佐剂等体积充分混合制成油包水乳剂。取小鼠甲状腺球蛋白0.5 ml,均匀分布于腹部、背部2 点皮下注射,初次免疫为每个点注射0.25 ml,14 d 后取甲状腺球蛋白与不完全弗氏佐剂等体积混合,再多点皮下注射,持续4 周。
1.3.2 分组60 只小鼠随机分为正常组、模型组和实验组,每组20 只。实验组给予75 mg/kg 大黄素灌胃,1 次/d,持续8 周;……
