李 霞，张 珂，闵 楠

(新疆医科大学附属肿瘤医院妇科，新疆 乌鲁木齐 830011)

经相关临床研究发现，经肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)作用后，巨噬细胞源性外泌体可以有效产生抑制功效，但其所存在着作用机制尚不明确。经另一项调查观察到，在卵巢癌细胞内对miRNA-7进行转染，可以有效对表皮生长因子受体以及受体下游信号通路的表达水平进行抑制，并可以对卵巢癌细胞迁移与侵袭作用进行抑制[1-12]。所以，本研究旨在探究经TWEAK作用后是否借助于对巨噬细胞与其外泌体内miRNA-7表达水平进行调控，抑制EOC细胞迁徙与迁移作用，现报告如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 实验中所使用的人单核细胞株THP-1购买自中国科学院上海生命科学研究院中细胞库内，使用市级内妇科肿瘤重点研究室长期保存着的人上皮性卵巢癌细胞株HO8910-PM。RPMI-1640培养基与胎牛血清来自于Hyclone公司；重组人TWEAK细胞因子来自于Sigma公司；佛波酯来自于PeproTech公司；总外泌体分离试剂盒与TRIzol试剂来自于Invitrogen公司；TaqMan microRNA反转录试剂盒来自于Applied Biosystems公司；U6的特殊性探针与miRNA-7来自于Applied Biosystems公司。Transwell小室属于Corning公司，此类型号为3422；0.22 μm滤器具来自于Millipore公司；Matrigel基质胶来自于BD公司)；在整个实验过程中主要使用CST公司的的蛋白检测抗体。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1细胞培养 人单核细胞THP-1与人上皮性卵巢癌细胞HO8910-PM培养在包含有纯度10%的胎牛血清的0% RPIM-1640培养基中，在37 ℃ 5%CO2条件下经培养箱中培养间进行传代。细胞通过1 500×g离心2 min后传代或是换液。THP-1细胞注意保持形态相同、透亮、圆形的悬浮状况有所发生。……