益母草碱抑制NLRP3 炎症小体过度激活调控巨噬细胞M1/M2 表型分化
2021-04-08泰州市人民医院药学部临床药学科江苏泰州225300
华 荣,陈 瑶 (泰州市人民医院药学部临床药学科,江苏 泰州 225300)
盆腔炎是一种常发病于年轻女性上生殖道感染的妇科疾病。临床研究发现,盆腔炎患者上生殖道内存在大量激活的巨噬细胞[1]。在炎症和病原体的刺激下,巨噬细胞过度激活可以释放出大量炎症因子,包括肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-18(IL-18)。研究发现,NLRP3 炎性小体激活可以促使caspase-1 活化并切割IL-18、IL-1β 前体,促进IL-18、IL-1β 的成熟与释放,而抑制NLRP3 炎性小体过度激活以减轻盆腔炎临床症状,并且与降低炎症因子、趋化因子释放有关。巨噬细胞在不同刺激下可以活化为不同表型:经典活化的M1 型和替代活化的M2 型。在含有脂多糖(LPS)和IFN-γ 微环境中,巨噬细胞活化为变形虫样的M1 型,参与炎症的发生。巨噬细胞在含有IL-4、IL-10、IL-13 等抗炎因子微环境中被活化为M2 型,表达精氨酸酶 1(Arg-1)和甘露糖受体1(CD206) 等特异性标志分子,参与炎症消退和组织重塑。研究发现,M1 /M2 比例失衡是多种炎症性疾病的病理标志,如肥胖[2]、糖尿病[3]、动脉粥样硬化[4]等。
益母草碱(LEO)是一种具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤作用的天然黄酮类化合物[5],研究报道显示益母草碱可抑制Bax/Bcl-2 信号通路激活抑制炎症因子的表达[6]。但鲜有益母草碱对巨噬细胞中NLRP3炎症小体影响的报道。本实验以益母草碱为研究对象,探讨其对巨噬细胞中NLRP3 炎症小体激活的影响,以及对巨噬细胞M1/M2 表型的调节作用。
1 材料与方法
1.1 实验材料
益母草碱(纯度>98%,西格玛奥德里奇贸易有限公司,上海);脂多糖(L6143)、DMEM 高糖培养基、胎牛血清、NuPAGE 10% Bis-Tris Gel、10×MOPS SDS 运行缓冲液、10×传输缓冲液、预制蛋白Marker、荧光定量PCR、反转录试剂盒(美国赛默飞世尔科技公司);……
