喻莹 陈建伟 陈志禹

摘 要 川贝母是中国最常用的化痰止咳贵重药草，贝母属植物种类繁多，各种属来源复杂，川贝母与其混伪品之间鉴别困难，近年来分子生物技术在川贝母鉴定中开始了大规模的应用研究，如PCR-RFLP、PCR-RAPD、SSR、PCRISSR、qPCR、DNA条形码、SNP、PCR-AFLP等技术的应用，并且展现出较好的应用前景。

关键词 分子生物技术 川贝母 鉴别

中图分类号：R282.5 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2021）05-0073-04

*基金项目：宁波市自然科学基金项目“realtime PCR用于检定川贝母掺伪情况的定量研究”（2018A610429）

Prospect of the application of molecular biotechnology in identification of Fritillaria cirrhosa*

YU Ying1**， CHEN Jianwei2***， CHEN Zhiyu2

（1. Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine， Hangzhou 310053， China； 2. Ningbo Institute for Drug Inspection， Zhejiang Ningbo 315000， China）

ABSTRACT Bulbus Fritillariae cirrhosae is phlegm cough precious herbs that is the most commonly used in China. There are many different kinds of plants of the genus Fritillaria and the sources of various genus are complex. The identification between Bulbus Fritillariae cirrhosae and the adulterants are difficult. Molecular biotechnology has begun a large-scale study in identification of Bulbus Fritillariae cirrhosae in recent years， such as PCR-RFLP， PCR-RAPD， SSR， PCR-ISSR， qPCR， DNA barcoding， SNP， PCR-AFLP and other technologies and shows a good application prospect.

KEY WORDS molecular biotechnology； Bulbus Fritillariae cirrhosae； identification

川贝母是百合科贝母属多年生草本植物，有淸热润肺，化痰止咳，散结消痈的功能。我国的药用贝母属植物超过50种，中国药典2015年版[1]共收录5大类贝母：川贝母、平贝母、伊贝母、浙贝母和湖北贝母，其中川贝母基原植物有： 川贝母（F. cirrhosa D. Don）、暗紫贝母（F. unibracteata Hsiao et K. C. Hsia）、甘肃贝母（F. przewalskii Maxim）、梭砂贝母（F. delavayi Franch）、太白贝母 （F. taipaiensis P. Y. Li）或瓦布贝母（F. unibracteata Hsiaoet K. C. Hsia var. wabuensis）。由于需求量大而资源少，优质川贝母价格昂贵，市场上存在用其他低价的近缘品种（如小平贝和伊贝母）充当川贝母出售的现象。中国药典2015年版规定的川贝母鉴别法主要有显微鉴别法、薄层色谱法以及PCR-RFLP法。近年来分子生物技术的应用，使其鉴定手段从传统形态表征扩展到了遗传物质DNA：核糖体上的ITS保守区序列、叶绿体上的psbA-tmH序列等，可定量、准确地对川贝母进行鉴别。本文就分子生物技术在川贝母鉴别中的应用及展望作一简单综述。

1 PCR-RFLP技术

PCR-限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）技术是以PCR技术为基础，扩增产物被限制性内切酶切割，产生不同长度的DNA条带，可通过条带灰度反应掺伪比例大小。……