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常量法和微量法测定蛋白质含量综合性实验设计

2021-04-06赵玉荣陈翠霞张黎民李幸凡王文鑫

实验技术与管理 2021年2期
关键词:测量实验

赵玉荣,陈翠霞,张黎民,李幸凡,王文鑫

(中国石油大学(华东) 化学工程学院,山东 青岛 266580)

实验教学在化学和生物学科教学中承担着不可替代的作用,是学生从事科研工作的基础。综合性设计实验有利于将传统的实验教学“以教师为中心”的模式转变为“以学生为中心”的模式。综合实验的开展有助于提高学生查阅文献和归纳总结的能力,是提高学生创新能力的重要途径之一[1-2]。蛋白质是组成人体细胞的基本成分,机体的重要生命活动都需要蛋白质的参与,它是生命活动的主要承担者[3-4]。蛋白质测定是指通过物理或化学方法对蛋白质含量进行测定,是生物化学和分子生物学研究中最常用的基本分析方法之一。测定蛋白质含量的方法包括凯氏定氮法、双缩脲法、酚试剂法、紫外吸收法和考马斯亮蓝法(Bradford 法)等。其中,Bradford 法因具有灵敏度高、测定快速简便和干扰物少等优点备受关注[5-11]。基于Bradford 法测定蛋白质含量的实验是生物化学本科教学实验的重要组成部分,但实验一般基于一种方法进行,往往导致两方面问题:一方面,学生不能很好地掌握常量法和微量法的区别;另一方面,单一仪器的应用很难解决多分组实验拥挤等资源紧张的问题。基于此,本文设计了利用紫外分光光度计(常量法)和多功能酶标仪(微量法)同时进行蛋白质含量测定的综合性实验。这种方法是根据蛋白质与染料相结合时产生复合物导致染料的颜色发生变化的原理设计的,如图1 所示。……

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